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當前位置:靶點科技(北京)有限公司>>技術文章>>懸浮細胞做好免疫熒光的關鍵步驟
您是否希望懸浮細胞的免疫熒光像貼壁細胞一樣容易?現(xiàn)在就是這樣!
靶點科技Shi-fix玻片允許懸浮細胞分層或直接作為單層生長。簡單,無憂的實驗方案,無需離心即可將懸浮細胞固定到載玻片上。只需將細胞添加到載玻片上,等待30分鐘,用PBS洗滌未結(jié)合的細胞并繼續(xù)免疫染色(或繼續(xù)培養(yǎng)以獲得所需的細胞密度)。
這些玻片也可用于染色懸浮細胞以進行顯微鏡檢查,或用于固定懸浮細胞以進行共聚焦顯微鏡檢查。更重要的是,如果需要,您還可以在細胞附著在玻片上時刺激它們。您可以像貼壁細胞一樣處理非貼壁細胞!
關鍵步驟:
1. 使用PBS清洗細胞,并將細胞重新懸浮于PBS中(2-5 百萬個/ml)
2. 把懸浮細胞專用免疫熒光玻片放置于12孔或者6孔細胞培養(yǎng)板孔里,直接滴加細胞于懸浮細胞專用免疫熒光玻片上(每個玻片上20-30萬個細胞)
3. 使細胞附著30分鐘,有些細胞需要延長附著時間,但不要超過1小時。使用約2ml PBS沖洗掉未結(jié)合細胞(切勿直接垂直滴加PBS到玻片上細胞,可將PBS滴加于板孔里側(cè)邊,然后輕輕搖晃3-5分鐘)
4. 在顯微鏡下檢查細胞附著情況,如果需要進一步培養(yǎng),那么加入1ml培養(yǎng)基即可;若不培養(yǎng)即可直接固定,染色。
四步走,操作示意圖如下:
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