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北京中檢維康生物技術(shù)有限公司

CLOVER嘔吐毒素親和柱的IAC-SEP原理和使用注意事項(xiàng)

時(shí)間:2022-7-26 閱讀:2044
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嘔吐毒素親和柱的原理和使用注意事項(xiàng)

原理

樣品經(jīng)提取液提取、過濾、稀釋,然后通過鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時(shí),嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附,用水或緩沖液將免疫親和柱IAC-SEP上的雜質(zhì)除去,然后用甲醇使抗體變性,從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來。最后,用HPLC或熒光計(jì)進(jìn)行定量檢測(cè)

注意事項(xiàng)

  1. 使用前,免疫親和柱需回至室溫(2225℃)。

  2. 樣品添加回收試驗(yàn)時(shí),標(biāo)準(zhǔn)品添加到樣品中,靜置2小時(shí)后或過夜,再進(jìn)行樣品前處理,否則會(huì)出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。

3)     操作步驟中,樣品過柱,淋洗,洗脫時(shí),一定要控制好流速,不能太快,否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏低。

4)     如果將標(biāo)準(zhǔn)品直接過柱驗(yàn)證回收率時(shí),一定要確保標(biāo)準(zhǔn)上柱液中甲醇濃度不要超過5%,否則會(huì)影響柱子的吸附能力。

5)     試驗(yàn)中使用的玻璃儀器等,一定要清洗干凈,尤其是用次氯酸等處理過的儀器,否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏低。

6)     當(dāng)用氮?dú)鉂饪s洗脫液時(shí),氮?dú)饬鞑灰?,否則會(huì)損失部分嘔吐毒素。

 

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