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安諾倫(北京)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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HE/化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)

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更新時(shí)間:2020-05-14 15:48:01瀏覽次數(shù):1510次

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蘇木素(Hematoxylin)-伊紅(Eosin)染色法,簡稱HE染色法。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色提供良好的核漿對(duì)比染色,是細(xì)胞化學(xué)染色常用的一種方法。

蘇木素(Hematoxylin)-伊紅(Eosin)染色法,簡稱HE染色法。蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核酸著紫藍(lán)色;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色提供良好的核漿對(duì)比染色,是細(xì)胞化學(xué)染色常用的一種方法。

 

實(shí)驗(yàn)步驟:

1.        樣品制備:對(duì)于貼壁生長細(xì)胞,胰酶消化,調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml,滴加于蓋玻片上(置于6孔板中),培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后,取出細(xì)胞爬片,用PBS 洗滌3次。

2.        樣品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗滌2次,每次1min。

3.        染核:蘇木素染液染色2-3min,自來水洗滌。

4.        分色:鏡下觀察,若細(xì)胞核染色過深,用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒,自來水洗滌。

5.        染胞質(zhì):浸入伊紅染液染色1min,自來水洗滌。

6.        吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后,中性樹膠封片。

7.        若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定,則染色時(shí)間相應(yīng)延長,蘇木素染色12-15min,伊紅5min即可。

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