CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系。動物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會變酸,因此常加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個緩沖對)來調(diào)節(jié)pH,以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣,以便于氣體的交換。
細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)箱一般為CO2培養(yǎng)箱,一是二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度提供精確穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。
是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要CO2培養(yǎng)箱了呢?
細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境一般是95%的空氣和5%的CO2。人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低,如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)液中的HCO3會被耗盡,這樣會影響細(xì)胞的正常生長。所以大部分動物細(xì)胞的培養(yǎng),還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
為什么動物細(xì)胞培養(yǎng)用CO2培養(yǎng)箱,植物細(xì)胞不用?
通常來說,CO2培養(yǎng)箱主要用來模擬形成一個類似細(xì)胞在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,例如提供適當(dāng)?shù)膒H值、溫度、濕度等。二氧化碳不僅是細(xì)胞生長的必需成分,還與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān),刺激細(xì)胞呼吸。植物體細(xì)胞可以在離體的情況下增值分化,對二氧化碳的要求不高,一般空氣中的濃度就可以滿足,只需保證空氣新鮮干凈即可。而動物體細(xì)胞不行,所以動物體細(xì)胞需要二氧化碳培養(yǎng)箱,而植物體細(xì)胞可以不使用二氧化碳培養(yǎng)箱。