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技術(shù)文章

PCR試劑凍干過程

閱讀:3416          發(fā)布時間:2020-7-12

PCR技術(shù)是一種在體外模擬DNA復(fù)制過程的核酸過程技術(shù)。PCR技術(shù)應(yīng)用于不對稱PCR制備單鏈DNA,反向PCR測定未知DNA區(qū)域,反轉(zhuǎn)錄PCR,cDNA末端快增技術(shù)等,PCR試劑包括:1.各種提取dna的常用試劑和純化dna所用的試劑。2.PCR taq酶,dntp(四種堿基),緩沖試劑(buffer),引物。3.瓊脂糖,聚丙烯酰胺凝膠,aps,tmed,eb等。在做其中一類PCR試劑凍干時,先將裝有PCR試劑的西林瓶放入凍干機倉內(nèi),預(yù)凍要大約經(jīng)過40-60分鐘,隔板溫度大約降到-50℃左右,預(yù)凍時低溫保持時間不低于3小時,一次干燥階段時要大約20-30分鐘抽真空至0.1mbar、再用至少3小時時間將擱板溫度升至-45℃左右,然后大約保持15-20小時。二次干燥階段大約4小時時間將擱板溫度升至20℃,然后保持至少要4小時。后軋蓋、出箱, 這樣PCR試劑的凍干制品就完成了。試劑凍干機Pilot5-8T熒光PCR試劑凍干機板層溫度均一度±1℃,系統(tǒng)極限真空度±1Pa,系統(tǒng)真空泄露率<3Pa.L/S適用于分子診斷試劑、酶聯(lián)免疫試劑、生化試劑等制品的凍干。

 

 

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