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凝膠成像系統(tǒng)具體可以用于哪些實(shí)驗(yàn)分析?

閱讀:1934      發(fā)布時(shí)間:2021-7-19
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凝膠成像系統(tǒng)是實(shí)驗(yàn)室常用的一種儀器,隨著分子生物學(xué)研究逐步普及,凝膠成像系統(tǒng)在國內(nèi)的需求在不斷增長。凝膠成像系統(tǒng)應(yīng)用范圍十分廣泛。總的來說,凝膠成像系統(tǒng)可以用于:蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析;確定生物分子的分子量;用于生物分子的定量分析。  
 
具體從使用分析的角度來看,凝膠成像系統(tǒng)可以應(yīng)用于分子量計(jì)算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規(guī)研究。  
 
1、分子量定量  
對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNAMarker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。此方法也適用于對PAGE蛋白膠條帶的分子量測定。  
 
2、密度定量  
一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長度片段的濃度。利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶,根據(jù)與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PAGE蛋白膠條帶的濃度測定。  
 
3、密度掃描  
在分子生物學(xué)和生物工程研究中,常用到的是對蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。傳統(tǒng)的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟件,結(jié)合白光照射的凝膠成像獲取圖片,就能完成此項(xiàng)工作。 
 
4、PCR定量  
PCR定量主要是指,如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對百分?jǐn)?shù)。就此功能而言,與密度掃描類似,但實(shí)際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進(jìn)行相對密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù),密度掃描時(shí)對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。  
 
EssentialV6凝膠成像系統(tǒng)既適用于簡單快速的捕獲圖像,也能優(yōu)化和捕獲高精度圖像。它適用于單個(gè)或多個(gè)用戶控制圖像采集和分析。可用于各種實(shí)驗(yàn)生物樣品的紫外、白光光源的成像分析,包括EB及多種熒光染料染色的凝膠樣品、考馬斯亮藍(lán)染色及銀染的蛋白膠樣品、微孔板、培養(yǎng)平皿等,其用途涵蓋凝膠成像、克隆計(jì)數(shù)、遷移率分析等。

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