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參考價(jià)	面議

技術(shù)服務(wù)

病毒包裝服務(wù)：慢病毒載體(Lentiviralvectors,LV)是在人免疫缺陷病毒(HIV-1病毒)基礎(chǔ)上改造而成的病毒載體系統(tǒng),它能高效地將目的基因?qū)雱?dòng)物和人的原代細(xì)胞或細(xì)胞系,對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力;慢病毒載體還可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而實(shí)現(xiàn)持久表達(dá)。

詳細(xì)介紹

干擾/敲除慢病毒（三保一）價(jià)格：5998元

過(guò)表達(dá)慢病毒價(jià)格：2800元起

服務(wù)優(yōu)勢(shì)

1、更多準(zhǔn)現(xiàn)貨最快1-2周交付1ml，高滴度病毒

2、病毒穿梭載體齊全，各種標(biāo)簽和啟子PEG，高速，層析等多種純化方式

3、完善的快速的售后體系，解決后顧之憂，不成功不收任何費(fèi)用

4、病毒使用無(wú)憂，保證蛋白水平明顯變化

慢病毒使用說(shuō)明

準(zhǔn)備貼壁細(xì)胞：第1天,在24孔培養(yǎng)板(以此為例)接種若干孔,每個(gè)孔內(nèi)接種3~5×10的4次方個(gè)目的細(xì)胞，以便進(jìn)行病毒感染時(shí)細(xì)胞的融合度約為70%。

第2天，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如細(xì)胞狀態(tài)較好則開始侵染。

病毒侵染：取出-80C的儲(chǔ)存的病毒，在冰上融化后，瞬時(shí)離心。使用含血清、不含抗生素的培養(yǎng)基，根據(jù)MOI配制慢病毒稀釋液（可設(shè)置不同MOI）。根據(jù)需要添加Polybrene，添加時(shí)需要設(shè)置合適的濃度吸去原細(xì)胞培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)基，添加配制好的慢病毒稀釋液?；靹蚝蠓庞诙趸寂囵B(yǎng)箱（37°C、5%的二氧化碳)孵育過(guò)夜。

去除病毒：第3天，更換培養(yǎng)液。一般在24小時(shí)候內(nèi)將含有慢病毒的培養(yǎng)液更換成正常培養(yǎng)液；如果侵染對(duì)細(xì)胞有明顯毒性作用而影響細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，可以在8-12小時(shí)更換培養(yǎng)液。

檢測(cè)結(jié)果：第4天，帶熒光標(biāo)簽的慢病毒可通過(guò)倒置熒光顯微鏡進(jìn)行侵染效果評(píng)估；帶螢火蟲熒光素酶標(biāo)簽的病毒可通過(guò)熒光素酶實(shí)驗(yàn)進(jìn)行侵染效果評(píng)估：也可通過(guò)qPCR或WB進(jìn)行侵染效果評(píng)估。