在細(xì)胞體外培養(yǎng)工作中，為了達(dá)到長(zhǎng)期保存細(xì)胞的生物活性的目的，須將細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存，并在實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng)。目前，細(xì)胞凍存最-常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護(hù)劑使細(xì)胞緩慢降溫至指定溫度范圍，從而到達(dá)保護(hù)細(xì)胞的目的。

普諾賽即用型無(wú)血清非程序凍存液是普諾賽技術(shù)團(tuán)隊(duì)在長(zhǎng)期的細(xì)胞研究過(guò)程中針對(duì)細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇不斷優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，面向數(shù)百種細(xì)胞研發(fā)出的專(zhuān)用凍存液產(chǎn)品。 

無(wú)血清非程序凍存液添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑，可延緩細(xì)胞在凍存過(guò)程中的沉降速率，防止細(xì)胞互相擠壓，影響細(xì)胞凍存效果。另外，添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑、滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑，這些成分在溶液中同水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過(guò)程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，能大大降低細(xì)胞在凍存過(guò)程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷，有效提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清、不含動(dòng)物源性蛋白，可減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全；不僅適用于常規(guī)細(xì)胞系、原代細(xì)胞，同時(shí)亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。 

與傳統(tǒng)凍存液相比，無(wú)需繁瑣費(fèi)時(shí)的程序凍存步驟或價(jià)格高昂的程序降溫儀，可直接重懸細(xì)胞后置于-80℃超低溫冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。如果想液氮中長(zhǎng)期保存，需先放入-80℃超低溫冰箱至少一天時(shí)間，方可移至液氮罐中保存。

無(wú)血清非程序凍存液產(chǎn)品特點(diǎn)

1、即用型細(xì)胞凍存液，隨用隨取，2-8℃穩(wěn)定保存1年以上；

2、無(wú)需繁瑣的程序凍存步驟或昂貴的程序降溫儀，直接放入-80℃冰箱，節(jié)省大量的時(shí)間和精力；

3、細(xì)胞復(fù)蘇率高達(dá)90%以上，適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存；

4、不含血清，批次間差異小；

5、能夠有效維持干細(xì)胞的多向分化潛能；

6、化學(xué)成分明確，沒(méi)有添加任何外源蛋白，減少細(xì)胞污染機(jī)會(huì)，同時(shí)減少外源蛋白對(duì)細(xì)胞正常生長(zhǎng)和分化的影響。

無(wú)血清非程序凍存液使用說(shuō)明

(一)細(xì)胞凍存

1、選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（90%左右），并保證在凍存前24 h內(nèi)換液一次，收集細(xì)胞，并將細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液（貼壁細(xì)胞可能需要用胰酶消化），計(jì)數(shù)；

2、將細(xì)胞懸液1000 r/min 離心5 min，棄上清；

3、向細(xì)胞沉淀物中加入細(xì)胞凍存液，輕輕吹打，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞密度達(dá)到5×10?-1×10?個(gè)/mL；

4、將上述細(xì)胞懸液按0.5 mL或1.0 mL的量，分裝于無(wú)菌細(xì)胞凍存管內(nèi)，擰緊管蓋，并做好標(biāo)記；

5、直接將分裝好的細(xì)胞凍存管直接置于-80℃超低溫冰箱中，可長(zhǎng)期冷凍保存。

6、如果想液氮中長(zhǎng)期保存，需先放入-80℃超低溫冰箱至少一天時(shí)間，方可移至液氮罐中保存。

(二)細(xì)胞復(fù)蘇

1、從液氮罐中取出凍存的細(xì)胞，立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時(shí)切勿使水浸沒(méi)凍存管口，以免造成細(xì)胞污染)；

2、待細(xì)胞凍存管中凍存液完-全融化后，立即逐滴加入少量細(xì)胞完-全培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞進(jìn)行混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有8-10 mL該細(xì)胞完-全培養(yǎng)基的試管中，輕輕混合均勻；1000 r/min離心5 min，棄上清；

3、加入1-2 mL完-全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照合適的接種密度將細(xì)胞接種到細(xì)胞培養(yǎng)容器中，加入適量的已預(yù)熱的新鮮的細(xì)胞完-全培養(yǎng)基；

4、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿，使細(xì)胞分布均勻，靜置于37℃、飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

無(wú)血清非程序凍存液穩(wěn)定性及保存條件

1、置于2-8℃避光保存，有效期為1年；

2、本產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超過(guò)保質(zhì)期，必須放棄使用；

3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請(qǐng)避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。

無(wú)血清非程序凍存液注意事項(xiàng)

1、凍存細(xì)胞分裝至凍存管后，應(yīng)減少在室溫/4℃存放時(shí)間，盡快移入到-80℃超低溫冰箱；

2、對(duì)于原代胚胎干細(xì)胞/iPS細(xì)胞/其它珍貴細(xì)胞樣本等凍存時(shí)，我們建議您在使用前，事先對(duì)所凍存的細(xì)胞進(jìn)行至少為期1周的細(xì)胞凍存測(cè)試實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)沒(méi)問(wèn)題后再進(jìn)行正式凍存；

3、本產(chǎn)品經(jīng)3次0.22 μm過(guò)濾除菌，使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免污染；

4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；

5、本產(chǎn)品僅用于科研用途，不可用于診斷、治療、臨床及其他用途。

無(wú)血清非程序凍存液文獻(xiàn)列表

• Aβ1-42 promotes microglial activation and apoptosis in the progression of AD by binding to TLR4 (2024-11-14)

  期刊：Redox Biology

  DOI：10.1016/j.redox.2024.103428

  影響因子 ：10.7

  引用產(chǎn)品： 通用血清型程序凍存液 ,  BV2 (DMEM) 細(xì)胞

• Impact of manufacturing processes on glycerolipid and polar lipid composition and ultrastructure in infant formula (2024-02-01)

  期刊：FOOD CHEMISTRY

  DOI：10.1016/j.foodchem.2024.138623

  影響因子 ：8.5

  引用產(chǎn)品： 無(wú)血清非程序凍存液