產(chǎn)品分類品牌分類

血清系列: SERANA胎牛血清低內(nèi)毒素膠原蛋白 ZETA LIFE胎牛血清

細(xì)胞轉(zhuǎn)染: 活體轉(zhuǎn)染試劑 LIPO3000轉(zhuǎn)染試劑高效轉(zhuǎn)染試劑

支原體清除: 支原體去除試劑

細(xì)胞凍存: 無血清細(xì)胞凍存液

實驗耗材: 多功能開關(guān)器封板膜 PCR & qPCR 孔板 qPCR耗材 PCR耗材

分子試劑: RNA提取等溫擴(kuò)增克隆突變 PCR系列核酸提取純化核酸染料

細(xì)胞增殖與凋亡: 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒細(xì)胞增殖及毒性檢測

Biozellen系列: 鼠尾膠原蛋白 3D基質(zhì)膠

培養(yǎng)基: 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞添加劑無血清培養(yǎng)基

ELISA試劑盒: 豬ELISA試劑盒小鼠ELISA試劑盒

TOYOBO（東洋紡）: PCR相關(guān)試劑

ZYMO RESEARCH: 試劑盒

Greiner（格瑞納）: 細(xì)胞培養(yǎng)小室

IKA（艾卡）: 刀頭

化學(xué)發(fā)光底物（ECL）: ECL化學(xué)發(fā)光液

PROSPEC系列: 單胺氧化酶

Epigentek系列: 細(xì)胞分析試劑盒

微生物檢測: 生化鑒定試劑盒

細(xì)胞生物學(xué): 細(xì)胞輔助試劑細(xì)胞檢測試劑

Corning康寧: 凍存管嵌套/小室

解離試劑: 胰蛋白酶

細(xì)胞類-實驗耗材: 細(xì)胞培養(yǎng)瓶細(xì)胞培養(yǎng)皿細(xì)胞培養(yǎng)板

原代細(xì)胞: 小鼠原代細(xì)胞

植物檢測系列試劑盒: 植物激素系列植物氧化與抗氧化系列植物氮代謝系列植物脂肪酸代謝系列植物固氮作用系列植物呼吸作用系列植物光合作用檢測試劑盒

SERANA: BSA

細(xì)胞系: 人源細(xì)胞系

生化試劑盒

環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）: 土壤氧化還原酶系列

類器官培養(yǎng): 培養(yǎng)試劑盒

緩沖器和解決方案: 抗生素培養(yǎng)添加物隱窩增強(qiáng)劑保護(hù)液洗滌液凍存液解離液

生物三凝膠基質(zhì): 細(xì)胞外基質(zhì)

細(xì)胞因子分子: 抑制劑激動劑

生物樣本庫: 類器官

蛋白研究系列: 蛋白緩沖 ALP發(fā)光液 ECL系列轉(zhuǎn)印膜轉(zhuǎn)膜封閉 PAGE凝膠試劑盒蛋白電泳蛋白制備免疫檢測

修飾檢測試劑盒: 蛋白修飾檢測試劑盒

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報告基因：β-半乳糖苷酶的原位染色實驗方法

時間：2021/11/5閱讀：2026

材料與儀器

β-gal表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞
D-PBSA 染色液
6 孔培養(yǎng)板恒溫箱倒置顯微鏡

實驗步驟

一、材料
非消毒物品

1. D-PBSA

2. 底物：X-gal（nvitrogen），以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL，用多聚丙烯管-20℃ 避光保存，最長可達(dá) 6 個月

3. 固定液：1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛，均以 PBSA 液配制；將 85 mL 水、10 mL 的 10x D-PBSA、5 mL 福爾馬林（37% 甲醛溶液）及 0.2 mL 戊二醛（25% 溶液）混合，制備成固定液，于 4℃ 儲存

4. 染色液：含 5 mmol/L 鐵氰鉀，5 mmol/L 亞鐵氰鉀，2 mmol/LMgCl2，以 D-PBSA 配制，4℃ 儲存

5. 底物/染色液：1 mg/mLX-gal，以染色液配制，現(xiàn)用現(xiàn)配

6. 含 10% 甲醛的 D-PBSA 液

7. 將β-gal 的表達(dá)質(zhì)粒作為報告基因轉(zhuǎn)染（如：pcMV β-gal ）

二、操作步驟：
1. 用 2 mL D-PBSA 液洗滌細(xì)胞（如在 6 孔培養(yǎng)板上）。

2. 用 1 mL 固定液于室溫下固定細(xì)胞 5 min。

3. 用 2 mL D-PBSA 洗滌細(xì)胞 2 次。

4. 將 1 mL 底物/染色液加入到每個培養(yǎng)孔內(nèi)，37℃ 孵育 2 h。

5. 用 2 mL D-PBSA 液沖洗每孔細(xì)胞，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞，計數(shù)藍(lán)染（β-gal 陽性）細(xì)胞。

6. 培養(yǎng)板的儲存。在每孔加 1 mL 含 10% 甲醛的緩沖鹽溶液，室溫下固定 10 min，然后用緩沖鹽溶液洗滌細(xì)胞，4℃ 儲存緩沖鹽溶液。

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報告基因：β-半乳糖苷酶的原位染色實驗方法

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