国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

廣州市艾貝泰生物科技有限公司

體外高效電轉(zhuǎn)化儀的操作要領(lǐng)

時間:2022-7-26 閱讀:8325
分享:
  胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細胞電穿孔(electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導(dǎo)入細胞膜內(nèi)部的重要方法。
 
  體外高效電轉(zhuǎn)化儀在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。
 
  體外高效電轉(zhuǎn)化儀使用:
 
  1.選擇合適的電場強度合適的電場強度對于電轉(zhuǎn)染實驗非常重要,電場強度不能過高,過高會增加細胞的死亡率;也不能過低,過低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同細胞系具有不同的*佳場強值,實驗前應(yīng)測定所轉(zhuǎn)染細胞系的電場強度。
 
  2.細胞的選擇用于電轉(zhuǎn)的細胞一般選取處于對數(shù)生長期的細胞(15代以內(nèi),傳代后2d)。因為處于對數(shù)生長期的細胞分裂旺盛,表面結(jié)構(gòu)致密比穩(wěn)定期的細胞差,電轉(zhuǎn)后,細胞膜的恢復(fù)能力強,而且處于有絲分裂期的細胞更容易接受外源DNA。
 
  3.質(zhì)粒的質(zhì)量應(yīng)選擇純度高的質(zhì)粒,DNA/RNA應(yīng)該超純(A260/A280>1.8),其次應(yīng)不含內(nèi)毒素,同時質(zhì)粒應(yīng)溶于雙蒸水而不是TE緩沖溶液。另外,DNA濃度不宜過高。
 
  4.選擇合適的電轉(zhuǎn)染試劑電擊會對細胞造成一定程度的傷害,在轉(zhuǎn)染試劑的選擇上要注意,應(yīng)選擇具有細胞膜修復(fù)成分的電轉(zhuǎn)染試劑,如Entranster-E,可將電擊對細胞的損傷降低。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話 產(chǎn)品分類
在線留言
明溪县| 静安区| 个旧市| 克什克腾旗| 根河市| 苗栗县| 义马市| 静海县| 望谟县| 新巴尔虎左旗| 黄骅市| 南城县| 宣汉县| 和静县| 东台市| 定陶县| 赤壁市| 昆明市| 会理县| 海南省| 葫芦岛市| 龙州县| 十堰市| 湛江市| 景德镇市| 黄浦区| 祁门县| 禹城市| 呼伦贝尔市| 平谷区| 连南| 澄江县| 浏阳市| 杭锦旗| 凭祥市| 乌拉特后旗| 汉源县| 葫芦岛市| 曲阜市| 门头沟区| 南昌市|