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凍存液302-14681的細胞凍存步驟和凍存細胞復(fù)蘇步驟

閱讀:1708      發(fā)布時間:2022-8-13
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   凍存液302-14681的細胞凍存步驟:
  1、常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細胞或者懸浮細胞于試管中。
 
  2、根據(jù)培養(yǎng)細胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細胞數(shù)。
 
  3、將所需數(shù)目的細胞懸浮液置于離心管中,收集培養(yǎng)細胞沉淀,棄去離心管中的上清液。
 
  4、加入適量的本凍存液于離心管中。輕柔地混勻細胞,制成細胞混合液。
 
  5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中。
 
  6、直接將分裝好的細胞凍存管置于溫冰箱中,可長期保存。
 
  7、若需液氮長期保存,需先置其中至少一天后方可轉(zhuǎn)至液氮罐中。
 
  凍存液302-14681的凍存細胞復(fù)蘇步驟:
  1、從冰箱中取出凍存的細胞,立即置于水浴槽中快速解凍。
 
  2、待凍存管中的細胞混合液*融化后,立即加入細胞培養(yǎng)基于凍存管中與細胞混合,將其中的混合液移至含有該細胞培養(yǎng)基的離心管中,收集凍存細胞沉淀,移去上清液(注意勿將細胞沉淀倒掉)。
 
  3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基,使用移液管緩緩加入細胞沉淀中,輕柔混勻,將混勻好的細胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。
 
  4、鏡檢觀察,待細胞狀態(tài)恢復(fù)后可進行其他研究或者培養(yǎng)處理。
 
  凍存液302-14681的注意事項:
  需在超凈臺內(nèi)使用,以避免雜菌污染。
 
  需和細菌混勻,否則細菌凍存液無法起到在低溫冷凍條件下對細菌的保護作用。
 
  對數(shù)期細菌凍存效果,但非對數(shù)期的或不是新鮮培養(yǎng)的細菌也可以用本細菌凍存液冷凍保存。

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