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酶標儀的選購需要考慮哪些參數(shù)要求

閱讀:475      發(fā)布時間:2023-2-2
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  酶標儀作為一個常用的儀器,其基本功能不外乎一個比色測定,與比色計所不同的是在測定波長范圍、吸光度范圍、光學系統(tǒng)、檢測速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測定軟件功能等方面的差異,當然全自動酶免疫分析系統(tǒng)還具有自動洗板、溫育、加樣等功能。我們在選購酶標儀時應(yīng)該考慮如下幾個關(guān)鍵參數(shù):
  濾光系統(tǒng)
  酶標儀簡單的是用濾光方式來劃分。一般來說,可以分為濾光片型和光柵型兩大類。也有一些酶標儀里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測,本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
  光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便,可以進行光譜掃描,靈活性等優(yōu)點。當然,濾光片系統(tǒng)也有其顯著的優(yōu)勢,例如價格較為便宜,檢測靈敏度高,帶寬的可選擇性,可以進行快速的濾光片切換,可配備有自動加樣系統(tǒng),在化學發(fā)光檢測中光線的透過率高。
  測定波長
  酶標儀有單波長和雙波長檢測功能。有時使用者不知在什么情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定;而“雙波長”則除了用對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定外,同時用對特異顯色不敏感的波長如630 nm進行測定,酶標儀最后打印出來的吸光度則為二者之差。630 nm波長下得到的吸光度是非特異的,來自于板孔上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此,在ELISA比色測定中,最好使用雙波長,且不必設(shè)空白孔。
  測定的吸光度范圍
  通常,酶標儀的吸光度測定范圍在0~2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0~2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。因此,對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
  光學系統(tǒng)
  酶標儀的光學系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導纖維,除測定通道外,有的酶標儀還有一個參比通道,每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統(tǒng)功能如何,均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現(xiàn)出來。光學系統(tǒng)好的話,則上述指標也應(yīng)較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
  溫育功能
  溫育功能是指酶標儀本身能按要求自動精確地控制儀器內(nèi)部的溫度,使得ELISA測定中微孔板條的溫育過程可在儀器內(nèi)部完成,而無需再外配溫箱。目前,只有少部分酶標儀具有此種功能,溫育功能只是酶標儀的一個附加功能,是否具有并不能說明酶標儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實驗室是否選擇,則可根據(jù)自己實驗室的條件及需要來決定。
  軟件功能
  軟件功能是指酶標儀所具有的對ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶標動力學、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析并報告結(jié)果的功能。軟件功能是中高檔酶標儀的一個非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大,則軟件就成為判定酶標儀優(yōu)劣的惟一指標。對于用戶來說,好的軟件功能,對實際工作會有較大的幫助。
  檢測速度
  酶標儀的檢測速度是指其完成比色測定所需要的時間。檢測速度快,有利于提高檢測的精密度,即避免由于測定過程中,因測定時間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。目前市場上常見的酶標儀檢測速度都非常快,通常在數(shù)秒鐘內(nèi)。
  震板功能
  酶標儀的震板功能是指酶標儀在對ELISA板孔進行比色測定前對其進行振蕩混勻,使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場上常見的酶標儀均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié);有的則較為固定。使用有震板功能的酶標儀,在進行ELISA測定顯色反應(yīng)完成加入終止劑后,可不必振蕩混勻,直接放人酶標儀上測定即可。
  語言界面
  通常進口的中高檔酶標儀人機對話多采用英文。這對于某些基層實驗室可能會存在語言方面的困難,從而難以最大限度地發(fā)揮酶標儀的作用。為解決這方面的問題,已有一些酶標儀采用了中文界面。這樣就大大方便了廣大基層實驗室技術(shù)人員的使用。
  綜上所述,盡管酶標儀的發(fā)展極為快速,種類繁多,功能也不斷加強,但其最根本的功用是不變的,即比色測定。大凡比色測定,其基本要求就是在一定吸光度范圍內(nèi)要有好的測定準確性、線性和精密性。同樣的吸光度范圍,測定的準確性、線性和精密性越好則酶標儀亦越佳。

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