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液相色譜基質的種類
液相色譜儀用的基質主要有如下幾種:
1 硅膠
硅膠是HPLC填料中zui普遍的基質。除具有較高強度外,還提供一個表面,可以通過成熟的的硅烷化技術鍵合上各種配基,制成反相、離子交換、疏水作用、親水作用或分子排阻色譜用填料。硅膠基質填料適用于廣泛的極性和非極性溶劑。缺點是在堿性水溶性流動相中不穩(wěn)定。
2 氧化鋁
具有與硅膠相同的良好物理性質,也能耐較大的pH的范圍。它也是剛性的,不會再溶劑中收縮或膨脹。但與硅膠不同的是,氧化鋁鍵合相在水性流動相中不穩(wěn)定,不過現(xiàn)在已經(jīng)出現(xiàn)了在水相中穩(wěn)定的氧化鋁鍵合相,并顯示出的ph穩(wěn)定性。
3 聚合物
以高交聯(lián)度的苯乙烯—二乙烯本或聚甲基丙烯酸酯為基質的填料是用于普通壓力下的HPLC,他們的壓力限度比無機填料低。苯乙烯—二乙烯苯基質疏水性強。使用任何流動相,在整個pH范圍內穩(wěn)定,可用NaOH或強堿來清洗色譜柱。甲基丙烯酸酯基質本質上比苯乙烯—二乙烯本疏水性更強,但它可以通過適當?shù)墓δ芑揎椬兂汕厮缘摹_@種基質不如苯乙烯—二乙烯那樣耐酸堿,但也可以承受在pH=13下反復沖洗。
所有聚合物基質在流動相發(fā)生變化時都會出現(xiàn)膨脹或收縮。用于HPLC的高交聯(lián)度聚合物填料,其膨脹和收縮要有限制。溶劑或小分子溶劑滲入聚合物基質中,因為小分子在聚合物基質中的傳質比在陶瓷性基質中慢,所以造成小分子在這種基質中柱效低。對于大分子像蛋白質或合成的高聚物,聚合物基質的效能比得上掏出小基質,因此,聚合物基質廣泛用于分離大分子物質。