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索萊寶Solarbio小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒(P8860)現(xiàn)貨供應(yīng)

閱讀:598      發(fā)布時(shí)間:2024-4-10
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產(chǎn)品名稱:索萊寶Solarbio小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒(P8860)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號(hào):P8860

產(chǎn)品品牌:索萊寶

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

規(guī)格

200mL/KIT

有效期

2

儲(chǔ)存條件

RT,避光

單位

產(chǎn)品組成:

各種動(dòng)物脾臟淋巴細(xì)胞分離液

200mL

全血及組織稀釋液

200mL

細(xì)胞洗滌液

200mL

實(shí)驗(yàn)流程:

淋巴細(xì)胞分離方法(僅供參考)

1. 制備脾臟的單細(xì)胞懸液。

2. 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,加入與脾臟單細(xì)胞懸液等量的分離液(分離液最少不得少于3 mL,總體積不能超過(guò)離心管的三分之二,否則會(huì)影響分離效果)。

3. 小心吸取單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取單細(xì)胞懸液,然后小心的平鋪于分離液上,因?yàn)閮烧叩拿芏炔町悾瑢⑿纬擅黠@的分層界面。)

4. 室溫,水平轉(zhuǎn)子500~900g,離心20~30min。(根據(jù)脾臟單細(xì)胞懸液的量確定離心條件,單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件可以自行摸索,以達(dá)到最佳分離效果)。

5. 離心后,此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。第一層為稀釋液層;第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層;第三層為透明分離液層;第四層為紅細(xì)胞層。

6. 用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞至另一潔凈的 15mL離心管中,向離心管中加入10ml細(xì)胞洗滌液洗滌白膜層細(xì)胞,250g,離心10min。

7. 棄上清,5mLPBS或細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞,250g,離心 10min。

8. 重復(fù)步驟7

9. 棄上清,細(xì)胞重懸備用。

脾臟單細(xì)胞懸液的制備方法(僅供參考)

脾臟研磨的方法:

1. 無(wú)菌條件下摘取脾臟,撕去脾臟被膜,用眼科剪將脾臟剪成小塊。

2. 將尼龍篩網(wǎng)或者是細(xì)胞過(guò)濾篩放置于平皿上,加入少量全血及組織稀釋液(保證脾臟及獲得的細(xì)胞處于液體環(huán)境中)。

3. 將脾臟放置于篩網(wǎng)上,使用注射器活塞或者是無(wú)菌鑷子來(lái)研磨脾臟(盡量控制研磨力度,保持篩網(wǎng)懸空,避免在皿底上直接研磨而造成大批細(xì)胞死亡)

4. 研磨后使用全血及組織稀釋液沖洗篩網(wǎng),收集細(xì)胞懸液,再經(jīng)濾網(wǎng)過(guò)濾。

相關(guān)文獻(xiàn):

[1] Yuying Liu,Xiaoyu Liang,Wenqian Dong,et al. Tumor-Repopulating Cells Induce PD-1 Expression in CD8+ T Cells by Transferring Kynurenine and AhR Activation. Cancer cell. March 2018. (IF 23.916)

[2] Qiushuang Zhang,Chao Xie,Dongyu Wang,et al. Improved Antitumor Efficacy of Combined Vaccine Based on the Induced HUVECs and DC-CT26 Against Colorectal Carcinoma. Cells. May 2019. (IF 5.656)

歡迎訂購(gòu):

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

P8860

小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒

200mL/KIT

 

天津益元利康生物科技有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)索萊寶Solarbio小鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒(P8860),歡迎選購(gòu)!

 

 


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