活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)得到純而壯的培養(yǎng)物，即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過(guò)程，因?yàn)楸４鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同，所以要活化，讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。那么你知道細(xì)菌活化的操作流程是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！
1. 在無(wú)菌操作下，用無(wú)菌微量吸管，從已溶解的管中吸取50μL(或1-2滴)的菌液，滴入固態(tài)培養(yǎng)基(培養(yǎng)基編號(hào)及溫度示于菌株訂購(gòu)單)某一邊緣附近，以劃線法接種于培養(yǎng)基。
2. 將接種好的培養(yǎng)基置于溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3. 在無(wú)菌環(huán)境下，以沾有75%酒精的棉花擦拭外管，在火焰上加熱外管之尖端。滴數(shù)滴無(wú)菌水于加熱處，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。取出隔熱纖維紙和內(nèi)管，以滅菌過(guò)的鑷子取出內(nèi)管之棉塞。
4. (a)適用于細(xì)菌用無(wú)菌吸管，吸取0.3-0.5mL之液體培養(yǎng)基，滴入內(nèi)管內(nèi)，并輕微震蕩(可用該吸管協(xié)助)，直到均勻懸浮。
(b)適用于霉菌、酵母菌用無(wú)菌吸管，吸取0.3-0.5mL無(wú)菌水，滴入內(nèi)管內(nèi)，待干燥粉末溶解后，以無(wú)菌吸管吸取并滴入約含有5ml無(wú)菌水之試管內(nèi)，輕微震蕩使其均勻后，靜置30至60分鐘。
5. 取0.1-0.2mL之菌體懸浮液于平板培養(yǎng)基上，做劃線分離培養(yǎng)或做成一系列之稀釋，用無(wú)菌L型玻棒均勻涂抹，以檢驗(yàn)菌種之純度及活化情形，而剩余的菌體則全部移入液體培養(yǎng)基內(nèi)，并依溫度培養(yǎng)之。
6. 某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，遲滯期(lagperiod)較長(zhǎng)，必須等培養(yǎng)二倍時(shí)間后才能長(zhǎng)出，且再經(jīng)過(guò)一、二次繼代培養(yǎng)(Subculture)后才能正常生長(zhǎng)。經(jīng)過(guò)以上的努力后仍培養(yǎng)失敗，才視為不能活化。
7. 未開封之冷凍干燥管，請(qǐng)冷藏于4℃冰箱，切勿冷凍保存。
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