潮霉素 B 無菌溶液
MCE 國際站：Hygromycin B, Sterile
品牌：MedChemExpress (MCE)
存儲條件：4°C 保存 2 年
簡介：MCE Hygromycin B, Sterile 是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過干擾 70S 核糖體易位和誘導(dǎo)對 mRNA 模板的錯讀而抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的正常合成，從而導(dǎo)致細(xì)菌、真菌和哺乳動物細(xì)胞死亡。
概述：MCE 即用型潮霉素 B 無菌溶液，已過濾除菌，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。潮霉素B 來源于吸水鏈霉菌（Streptomyces hygroscopicus），是一種氨基糖苷類抗生素，主要通過干擾 70S 核糖體易位和誘導(dǎo)對 mRNA 模板的錯讀而抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)的正常合成，從而導(dǎo)致細(xì)菌、真菌和哺乳動物細(xì)胞死亡。大腸桿菌（Escherichia coli）來源的潮霉素抗性基因（hyg 或 hph），編碼潮霉素 B 磷酸轉(zhuǎn)移酶，可將潮霉素 B 轉(zhuǎn)化成磷酸化產(chǎn)物，使其失去生物活性。因此，潮霉素 B 可用于篩選、維持培養(yǎng)成功轉(zhuǎn)染了潮霉素抗性基因的原核或真核細(xì)胞
描述：
潮霉素B是從吸水鏈霉菌中純化得到的氨基糖苷類抗生素，通過與細(xì)菌核糖體的70S亞基結(jié)合，抑制蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致細(xì)菌、真菌和哺乳動物細(xì)胞死亡。
對潮霉素B的抗性是由大腸桿菌潮霉素抗性基因（hyg或hph）賦予的，因此，潮霉素B可用于篩選和維持轉(zhuǎn)染了潮霉素抗性基因的原核和真核細(xì)胞。低純度的潮霉素可引起不同的毒性作用，因此在實驗中掌握其純度至關(guān)重要。
操作說明：1. 潮霉素 B 溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。一般而言，哺乳動物細(xì)胞 50-1000 μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞 20-200 μg/mL；真菌 300-1000 μg/mL。2. 對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve，即劑量效應(yīng)曲線），來確定最佳篩選濃度：1）以 20-25% 的細(xì)胞密度進(jìn)行鋪板，鋪足夠量的孔以進(jìn)行后續(xù)的梯度實驗，37°C 培養(yǎng)過夜。2）準(zhǔn)備含梯度濃度潮霉素 B 的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。以哺乳動物為例，常用濃度為 50-1000 μg/mL，可設(shè)定 50、100、250、500、750、1000 μg/mL 六個濃度。3）細(xì)胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細(xì)胞。每個濃度做 3 個平行對照。4）約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。5）每日監(jiān)測細(xì)胞，觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度。
注意事項：1. 注意無菌操作，避免污染。2. 本產(chǎn)品的工作濃度是針對含血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基而設(shè)定的，在無血清培養(yǎng)基中使用時應(yīng)適當(dāng)減少用量，以免造成細(xì)胞毒性。3. 本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療。5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品：S-Gboxin | BV6 | Saquinavir (mesylate) | CGP37157 | N-Methylpyrrolidone | Lamotrigine | Quinine | Boc-Gln-Ala-Arg-AMC (acetate) | Faropenem sodium | Metyrapone
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