Annexin V-PE 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
MCE 國際站:Annexin V-PE Apoptosis Detection Kit
品牌:MedChemExpress (MCE)
存儲條件: -20℃ 保存一年。避光保存,避免反復(fù)凍融
簡介:MCE Annexin V-PE 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒可方便、快捷的檢測細(xì)胞凋亡。經(jīng) Annexin V-PE 染色后,正常細(xì)胞基本無熒光,凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞呈紅色熒光。
概述:MCE Annexin V-PE 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒采用藻紅蛋白(Phycoerythrin, PE)標(biāo)記的重組人 Annexin V 來檢測細(xì)胞凋亡。在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè);細(xì)胞凋亡早期,PS 會外翻到細(xì)胞膜外側(cè)。Annexin V(膜聯(lián)蛋白 V)是一種 Ca 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,可與 PS 特異性結(jié)合,因此 Annexin V 常作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。Annexin V 經(jīng) PE 標(biāo)記后可發(fā)紅色熒光,利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。經(jīng) Annexin V-PE 染色后,正常細(xì)胞基本無熒光,凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞呈紅色熒光。
描述:
MCE Annexin V-PE 凋亡檢測試劑盒提供了一種快速、方便的檢測細(xì)胞凋亡和壞死的方法。在正?;罴?xì)胞中,磷脂酰絲氨酸 (PS) 位于細(xì)胞膜的細(xì)胞質(zhì)表面。在細(xì)胞凋亡開始時(shí),PS 從膜的內(nèi)層轉(zhuǎn)移到外層。Annexin V 是一種 35-36 kDa Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白,對 PS 具有高親和力。用 Annexin V-PE 染色細(xì)胞后,活細(xì)胞幾乎不顯示熒光,凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞顯示紅色熒光。
操作說明:1. 收集細(xì)胞:收集 1-5 × 105 個(gè)細(xì)胞。懸浮細(xì)胞:1000 g 離心 5 min,棄去上清。加入 1 mL 預(yù)冷的 PBS 輕輕重懸細(xì)胞沉淀,1000 g 離心 5 min,棄去上清,保留細(xì)胞沉淀。貼壁細(xì)胞:小心吸取細(xì)胞培養(yǎng)液保存?zhèn)溆?。加?PBS 洗滌后,加入適量胰酶消化液(盡量不含 EDTA,以免影響 Annexin V 和 PS 的結(jié)合)消化細(xì)胞。加入前面收集的培養(yǎng)液,輕輕吹打細(xì)胞,制成單細(xì)胞懸液,1000 g 離心 5 min,棄去上清。加入 1 mL 預(yù)冷的 PBS 輕輕重懸細(xì)胞沉淀,1000 g 離心 5 min,棄去上清,保留細(xì)胞沉淀。2. 加入 195 μL Binding Buffer,輕輕重懸細(xì)胞。3. 加入 5 μL Annexin V-PE,輕輕混勻。注:可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 Annexin V-PE 的使用量。4. 室溫下避光孵育 10-20 min。注:孵育過程中可輕輕顛倒數(shù)次以加強(qiáng)染色效果。5. 檢測與分析流式細(xì)胞儀檢測:用流式細(xì)胞儀檢測熒光強(qiáng)度注:PE 可以被 495 nm、545 nm 或 564 nm 的激發(fā)光激發(fā),發(fā)出峰值為 575 nm 的熒光。熒光顯微鏡檢測:1000 g 離心 5 min,棄去上清,加入 50-100 μL Binding Buffer 輕輕重懸細(xì)胞沉淀,涂片后用熒光顯微鏡檢測熒光強(qiáng)度
注意事項(xiàng):1. 熒光染料都存在淬滅的問題,染色后應(yīng)盡快檢測熒光強(qiáng)度,且整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程盡量避光下進(jìn)行。2. 若使用胰酶處理貼壁細(xì)胞,應(yīng)盡可能地去除胰酶,防止 Annexin V-PE 降解從而導(dǎo)致染色失敗。3. Annexin V-PE 對人體有害,操作時(shí)務(wù)必小心。4. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
銷售產(chǎn)品:URMC-099 | Stachydrine | Valrubicin | Cenisertib | Oil Red O | GMQ | Filanesib | Ganoderal A | BEBT-908 | AG-09/1
Trending products:Recombinant Proteins | Bioactive Screening Libraries | Natural Products | Dye Reagents | PROTAC | Isotope-Labeled Compounds
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