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嘌呤霉素?zé)o菌溶液

MCE 國際站：Puromycin, Sterile

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K1057

中文名稱：嘌呤霉素?zé)o菌溶液

存儲條件：-20℃；2 年

產(chǎn)品活性：嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質(zhì)合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細(xì)胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。

生物活性：MCE 即用型嘌呤霉素?zé)o菌溶液，已過濾除菌，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質(zhì)合成從而殺死多數(shù)革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細(xì)胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。 嘌呤霉素被廣泛用作哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的篩選抗生素。其抗性來自于嘌呤霉素產(chǎn)生（Streptomyces alboniger）內(nèi)發(fā)現(xiàn)的 pac 基因，將此基因?qū)爰?xì)胞可使細(xì)胞獲得嘌呤霉素抗性，從而用于篩選和維持培養(yǎng)攜帶 pac 基因的哺乳動物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。在某些特定情況下，也可以用來篩選表達(dá) pac 基因的大腸桿菌菌株。

操作流程：1. 嘌呤霉素溶液的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細(xì)胞代謝率而適當(dāng)調(diào)整。 2. 對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），來確定最佳篩選濃度 1) 以 20-25% 的細(xì)胞密度鋪板，鋪?zhàn)銐蛄康目滓赃M(jìn)行后續(xù)的梯度實(shí)驗(yàn)，37℃孵育過夜。 2) 準(zhǔn)備含梯度濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。 3) 細(xì)胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細(xì)胞。 每個濃度做 3 個平行對照。 4) 約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。每日監(jiān)測細(xì)胞，觀察活細(xì)胞比例。通常 7-10 天內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的低濃度為篩選用的工作濃度。

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