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嘌呤霉素無菌溶液

MCE 國際站：Puromycin, Sterile

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-K1057

中文名稱：嘌呤霉素無菌溶液

存儲條件：-20℃；2 年

產品活性：嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質合成從而殺死多數革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。

生物活性：MCE 即用型嘌呤霉素無菌溶液，已過濾除菌，可直接用于細胞培養(yǎng)。嘌呤霉素來源于白黑鏈霉菌（Streptomyces alboniger），是一種氨基糖苷類抗生素，可以通過抑制蛋白質合成從而殺死多數革蘭氏陽性菌及各種動物或昆蟲細胞，在某種特殊情況下也可有效作用于大腸桿菌。 嘌呤霉素被廣泛用作哺乳動物細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中的篩選抗生素。其抗性來自于嘌呤霉素產生（Streptomyces alboniger）內發(fā)現的 pac 基因，將此基因導入細胞可使細胞獲得嘌呤霉素抗性，從而用于篩選和維持培養(yǎng)攜帶 pac 基因的哺乳動物穩(wěn)定轉染細胞株。在某些特定情況下，也可以用來篩選表達 pac 基因的大腸桿菌菌株。

操作流程：1. 嘌呤霉素溶液的工作濃度需要根據細胞類型、培養(yǎng)基、生長條件和細胞代謝率而適當調整。 2. 對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），來確定最佳篩選濃度 1) 以 20-25% 的細胞密度鋪板，鋪足夠量的孔以進行后續(xù)的梯度實驗，37℃孵育過夜。 2) 準備含梯度濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基為篩選培養(yǎng)基，至少 5 個梯度。 3) 細胞過夜培養(yǎng)后，使用上述配制的篩選培養(yǎng)基替換舊培養(yǎng)基，孵育細胞。 每個濃度做 3 個平行對照。 4) 約 2-3 天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。每日監(jiān)測細胞，觀察活細胞比例。通常 7-10 天內能夠殺死絕大多數細胞的低濃度為篩選用的工作濃度。

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