化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
蛋白電泳：如何跑出漂亮的條帶 二
閱讀：1273 發(fā)布時間：2015-7-6
之前我們就電泳過程中出現(xiàn)的涂抹痕跡展開了解釋，今天主要討論 SDS-PAGE 實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)條紋拖尾的原因進(jìn)行分析?？牲c(diǎn)擊閱讀原文查看前天推送的內(nèi)容。
這個不是非常嚴(yán)重，有條紋拖尾的泳道（圖中左邊第 5 道）也是可以用的。條紋的出現(xiàn)是由于一部分膜組分中的高濃度蛋白在跑積層膠過程中析出然后在很短的時間里又回到溶液中。由于分離膠表面存在輕度的缺陷（可能是在倒積層膠之前分離膠干了一些），造成整個泳道的蛋白濃度的不一致，使得出現(xiàn)這種條紋拖尾癥狀，而不是一致的很深的背景。
第 4 道也是由于上述原因而出現(xiàn)條紋拖尾。電場受到了第4道非均一濃度的影響而出現(xiàn)了條帶的縮窄。注意凝膠前端染料的缺失，是由于電泳時間過長所致。
這塊膠就非常難看了。原因在于分離膠倒完之后沒有用水或者異丙醇壓膠，導(dǎo)致分離叫上緣非常粗燥，就像你看到的一樣。當(dāng)樣品堆積在凹凸不平的分界線時，位于凹陷部位的蛋白由于不能適當(dāng)?shù)臐饪s就析出來了。然后再跑膠過程中逐漸溶解造成了條紋拖尾癥狀。