諾博萊德 T4 DNA Ligase T4原理載體及其他

T4 DNA Ligase

目錄號：42017

試劑盒組成、包裝：

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)  

     濃度： 5U/ml

儲運(yùn)溫度：-20℃（保存6個月）

制品說明：T4 DNA Ligase 是從表達(dá)T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化而來的。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接，修復(fù)雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口。

適用范圍：（1）DNA片段和載體DNA快速連接；

（2）限制酶切片段的克?。?/span>

（3）將DNA片段與Linker或Adaptor連接。

酶貯存緩沖液：

 20mM Tris-HCl (pH7.5)， 0.1 mM EDTA， 1mM DTT， 50 mM KCl， 50% glycerol。

10×Ligation Buffer：

400 mM Tris-HCl， 100 mM MgCl₂， 100 mM DTT，5 mM ATP(PH7.8)，其他成分。

建議連接反應(yīng)體系： (以 10 μl 反應(yīng)體系為例)

反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置：

粘端連接：22^oC反應(yīng)10分鐘(可根據(jù)需要延長到1小時)；也可以16^oC反應(yīng)1-5小時。

平端連接：22^oC反應(yīng)2小時或16 ^oC過夜。

T4 DNA Ligase T4原理載體及其他