前面三點(diǎn)講的都是內(nèi)在原因造成的基線噪音或者波動(dòng)。如果你前面的原因都找過(guò)了，問(wèn)題還沒(méi)有解決，就得考慮一下是不是流動(dòng)相里面有雜質(zhì)了。

四、系統(tǒng)潔凈程度
如何檢查判斷是否是流動(dòng)相問(wèn)題？
a. 每次更換一種流動(dòng)相，看基線結(jié)果。
b. 重新配置所有流動(dòng)相。這種方式比較快，但可能無(wú)法找到根本原因。
   要特別注意在流動(dòng)相的配置過(guò)程中，是否引入了污染，比如使用了不干凈的玻璃器皿等。
c. 更換溶劑的品牌和批次也是方法之一。
色譜柱長(zhǎng)期使用造成的污染有時(shí)候也會(huì)造成基線波動(dòng)。
    有些時(shí)候樣品里面可能有些保留非常強(qiáng)的組分，可能在色譜柱上很長(zhǎng)時(shí)間才慢慢被沖出來(lái)，這時(shí)候已經(jīng)不是一個(gè)峰了，而是基線的干擾或者波動(dòng)了。
避免這種問(wèn)題的方法：在每次做樣后，用甲醇或者乙腈長(zhǎng)時(shí)間沖洗色譜柱。
另外，專(zhuān)柱也是一個(gè)好的習(xí)慣。如果一根色譜柱上做很多不同的樣品，也可能導(dǎo)致互相之間的污染和影響。

五、電路的噪音
對(duì)于UV檢測(cè)器來(lái)說(shuō)，就是采樣頻率不合適而產(chǎn)生的噪音。
    現(xiàn)在隨著超液相的普及，檢測(cè)器的采樣頻率也越來(lái)越高，有的可以達(dá)到80Hz以上。但是如果一味追求高采樣頻率，可能對(duì)靈敏度沒(méi)有任何幫助，反倒產(chǎn)生比較大的噪音。
一般來(lái)說(shuō)，我們需要保證一個(gè)色譜峰上面有15-20個(gè)點(diǎn)，來(lái)保證比較平滑的峰形和比較準(zhǔn)確的定量結(jié)果。
如果我的一個(gè)峰的時(shí)間寬度是0.5min，就是是30s，那只要保證1Hz的采樣頻率就足夠了。
如果在UPLC上面，一個(gè)峰的時(shí)間寬度是0.05min，也就是3s,就需要10Hz以上的采樣頻率。
那80Hz的采樣頻率什么時(shí)候用呢？你的一個(gè)峰只有0.5s的時(shí)候用。
理論上的計(jì)算是這樣的：N=16（T/W）^2
N是柱效；T是保留時(shí)間；W是峰寬。
一般色譜如果柱效12000的塔板數(shù)，在5min的時(shí)候，出峰寬度大概計(jì)算出來(lái)是11s。
你可以根據(jù)計(jì)算結(jié)果來(lái)調(diào)整檢測(cè)器合適的采樣頻率。

    上面從理論到實(shí)踐，從各個(gè)方面分析了液相色譜基線噪音或者波動(dòng)的來(lái)源，以及相應(yīng)排除問(wèn)題的方法，希望可以幫助到你。