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FAIMS Pro

相信很多老師對(duì)于賽默飛的FAIMS Pro(High-field asymmetric waveform ion mobility spectrometry，高場(chǎng)非對(duì)稱波形離子遷移譜)接口已經(jīng)非常熟悉和了解了。FAIMS Pro（圖一）是一種在大氣壓條件下分離離子的技術(shù)，安裝在大氣壓離子源與MS真空腔的入口之間，通過電極上的補(bǔ)償電壓除去蛋白質(zhì)組學(xué)樣品中一價(jià)離子對(duì)檢測(cè)帶來的干擾，降低背景噪音，從而擴(kuò)大蛋白鑒定的深度。

圖1 Exploris 480 質(zhì)譜儀 配置FAIMS Pro 和Easy nLC 1200

FAIMS Pro接口一經(jīng)推出，就收到了廣泛好評(píng)。從 2018 年下半年發(fā)布以來，已發(fā)表了 47 篇同行評(píng)議的文章，覆蓋 19 個(gè)不同的研究應(yīng)用領(lǐng)域，包括肽段、蛋白和蛋白復(fù)合物分析，集中在發(fā)現(xiàn)/表征和非標(biāo)定量（LFQ）及標(biāo)記定量（TMT）等相關(guān)的應(yīng)用（圖二）。

圖2 FAIMS Pro 發(fā)表文章匯總

今天我們要隆重介紹的是全新一代的FAIMS接口，F(xiàn)AIMS Pro Duo。那么接下來讓我們看看FAIMS Pro Duo都有哪些新表現(xiàn)。

增強(qiáng)選擇性，超高靈活性

為了滿足分析各個(gè)實(shí)驗(yàn)室與日俱增的對(duì)復(fù)雜樣品，不同種類化合物的定性和定量需求，FAIMS Pro Duo在保留前一代對(duì)多肽蛋白類化合物分析性能的基礎(chǔ)上增加了對(duì)于小分子化合物的分析定量能力，使FAIMS Pro Duo的應(yīng)用場(chǎng)景不單局限于蛋白質(zhì)組學(xué)樣品分析，更可以應(yīng)用到常規(guī)定量分析。

FAIMS Pro Duo相比較于前一代FAIMS Pro 保留了之前所有的低流速性能，并擴(kuò)展支持高流速應(yīng)用，最大適用流速達(dá)到了1mL/min。其采用優(yōu)化的的圓柱形幾何形狀，大大增加了離子傳輸?shù)劫|(zhì)譜儀的概率，縮短了停留時(shí)間，同時(shí)允許每個(gè)數(shù)據(jù)采集方法進(jìn)行多個(gè) CV 設(shè)置。拆裝速度快，不需要破壞真空，組裝僅需兩分鐘，單向wan美對(duì)齊，無需微調(diào)，不需要使用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校正（圖三）。

圖3 FAIMS Pro Duo 內(nèi)部結(jié)構(gòu)

升級(jí)之后的FAIMS Pro Duo不僅可以搭載在蛋白質(zhì)組學(xué)常用的質(zhì)譜平臺(tái)Exploris240，480，三合一質(zhì)譜Eclipse以及Fusion Lumos上。FAIMS Pro Duo也可以搭載到Exploris 120，以及三重四極桿平臺(tái)TSQ Altis和Quantis上，更方便于常規(guī)流速下的定量分析（圖四）。

圖4 FAIMS Pro Duo 可適用的應(yīng)用及LC-MS系統(tǒng)

CV優(yōu)化，降低噪音，助力靶向定量

由于不同的價(jià)態(tài)或者分子量的化合物其*條件下的CV都各有差異。所以針對(duì)于定量實(shí)驗(yàn)，FAIMS Pro Duo 增加了CV優(yōu)化的功能。不管是使用直接進(jìn)樣或者是在線的色譜分離方法都可以直接對(duì)一種或者多種化合物進(jìn)行調(diào)諧和CV優(yōu)化（圖五），大大簡(jiǎn)化了FAIMS Pro Duo接口與 Thermo Scientific質(zhì)譜儀的設(shè)置和使用，縮短方法開發(fā)的時(shí)間。

圖5 色譜分離的方法優(yōu)化CV值

FAIMS Pro Duo去除基質(zhì)干擾的能力在化合物定量下限濃度附近表現(xiàn)更為明顯（圖六）。當(dāng)化合物濃度接近定量*，如果目標(biāo)化合物出峰附近有基質(zhì)干擾峰，這時(shí)基質(zhì)干擾峰會(huì)影響目標(biāo)化合物的檢測(cè)，出現(xiàn)色譜峰信噪比低，積峰困難等情況。我們可以通過使用FAIMS Pro Duo的自動(dòng)CV優(yōu)化功能，對(duì)目標(biāo)化合物的CV電壓進(jìn)行優(yōu)化，用FAIMS Pro Duo去除掉部分的雜質(zhì)離子，從而提升目標(biāo)化合物的信噪比，進(jìn)一步降低定量LOQ。

圖6 FAIMS Pro Duo可以增加LOQ的信噪比，降低定量下限

以上就是FAIMS Pro Duo的新特性，它在保留了前一代FAIMS Pro在蛋白質(zhì)組學(xué)里去除雜質(zhì)干擾，擴(kuò)大蛋白鑒定深度上的良好表現(xiàn)，進(jìn)一步增加了它在定量分析上的適用性。最重要的是它還支持從FAIMS Pro的現(xiàn)場(chǎng)升級(jí)，感興趣的老師快來聯(lián)系我們吧！

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