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上海乾思生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

18901934629

原代細(xì)胞凍存技術(shù)

時(shí)間:2011/11/11閱讀:1154
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細(xì)胞1、選用生長情況好,數(shù)量較多的原代細(xì)胞,凍存前一天換液一次。
細(xì)胞2、貼壁細(xì)胞需用0.25%胰酶常規(guī)消化將細(xì)胞消化下來,將細(xì)胞懸液收集至離心管中。
細(xì)胞3、1000rpm離心5分鐘,棄上清液。
細(xì)胞4、沉淀加含DMSO的培養(yǎng)液,計(jì)數(shù),調(diào)整至(1-10)×106/ml。
細(xì)胞5、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。
細(xì)胞6、密封凍存管,封口一定要嚴(yán),否則復(fù)蘇時(shí)易出現(xiàn)爆裂。
細(xì)胞7、用記號(hào)筆標(biāo)明細(xì)胞種類,凍存日期。
細(xì)胞8、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃過夜)→液氮。

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