分子生物學試劑盒現(xiàn)在,分子生物學正在并zui終肯定會讓咱們對全部生命科學有一個全部而*的知道,其對免疫測定技能開展的影響也是直接而又有用的,它使咱們對曾經(jīng)一些難以檢查的生物活性物質(zhì)的測定變得垂手可得,而且大大提高了檢查的靈敏度和特異性。
1、基因工程試劑對分子生物學試劑盒開展的影響
免疫測定技能之間的特異反響,所以任何優(yōu)異的確診試劑離不開優(yōu)異的質(zhì)料,如抗原抗體,酶等。分子生物學試劑盒曾經(jīng)用于免疫測定的抗原一般為各種純化抗原,分子生物學試劑盒而抗體則為純化抗原免疫動物后取得的多克隆抗體和運用雜交瘤技能得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標記物如酶標物則通過各總化學組成辦法制備。這些年,跟著分子生物學的開展,運用基因工程辦法制備各種特別的抗原或抗體及其酶物等免疫測定試劑幾變成實際的新一代試劑,各種新式運用的測定辦法也不斷呈現(xiàn)。
1 HCV-分子生物學試劑盒
HCV現(xiàn)在尚不能體外培養(yǎng),只能用基因工程或化學組成辦法獲取HCV構(gòu)造和非構(gòu)造區(qū)的各種抗原片斷,已知HCV基因組有7個功用區(qū)構(gòu)成:核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5(有分為NS和NS5b)區(qū),組成抗原的長處是易于純化,特異性好,抗原抗體反響強。
2.1.1 *代抗HCV-分子生物學試劑盒:
-由美國ortho公司克隆C1003抗原幾個片斷與人超氧化物歧化酶(SOD)。用酵母從病毒基因組非區(qū)得到表達,表達為交融蛋白,亦作為包被固相載體。
-抗原組合:NS4 區(qū)二個基因片斷為NS 5-1-1和C1003
-特性:IgG抗C100在發(fā)病后數(shù)月后,才檢出,故不宜作前期確診。
-約由20%的患者不呈現(xiàn)抗體。分子生物學試劑盒IgM抗-C100急性期檢出率只有64%。
-C100的抗原性較弱,在HCV仿制中,不能充沛暴露宿主的免疫系統(tǒng)。
-特異性和靈敏性較差。
2.1.2 第二代HCV-分子生物學試劑盒
-用基因重組的HCV構(gòu)造蛋白與非構(gòu)造蛋白抗原包被固相載體。
-抗原組合:核心區(qū)(C區(qū))多肽C22 NS區(qū)多肽C33 C1003和NS 5-1-1
-添加C22區(qū)和C33區(qū)后,抗體呈現(xiàn)早,有助前期確診,提高陽性率。有利前期確診。
-C22是前期易呈現(xiàn)病毒血癥
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