產(chǎn)品說(shuō)明

蛋白質(zhì)被稱(chēng)為“生命的物質(zhì)基礎(chǔ)”，它是生命科學(xué)領(lǐng)域zui重要的大分子之一。蛋白質(zhì)由多肽氨基酸組成，它在生物體內(nèi)發(fā)揮著各種關(guān)鍵的作用。蛋白質(zhì)定量檢測(cè)是生命科學(xué)家常用的方法。簡(jiǎn)單、直接、自動(dòng)化的蛋白質(zhì)濃度檢測(cè)方法是zui為理想的。本公司生產(chǎn)的蛋白質(zhì)測(cè)試法是基于改進(jìn)的考馬斯藍(lán)G的方法。顯色劑與蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)復(fù)雜反應(yīng)形成藍(lán)色，其顏色強(qiáng)度（595nm）與樣品中的蛋白質(zhì)濃度成正比。優(yōu)化配方大幅減少了原樣品中物質(zhì)的干擾以及對(duì)多肽的更為敏感。  

產(chǎn)品用途

直接檢測(cè)樣品蛋白質(zhì)的總含量。

產(chǎn)品特點(diǎn)

靈敏、準(zhǔn)確：用10 mL樣品。測(cè)試范圍 0.06 – 1.0 mg/mL 蛋白質(zhì)。

簡(jiǎn)單、高通量： 測(cè)試過(guò)程僅需添加工作試劑及讀取吸光度。易于自動(dòng)化高通量測(cè)試，每天可檢測(cè)幾千份樣品。

低干擾:葡萄糖、維生素、氨基酸、DNA、 RNA、鹽、 EDTA (< 12 mM) 、 苯酚 (< 50 mM) 、 尿素 (< 0.6 M) 、表面活性劑 (< 0.1%) 和SDS (< 0.1% SDS) 均不影響測(cè)試。

多功能性: 測(cè)試可用96孔板或比色皿進(jìn)行。

試劑盒組成(96孔板供500份測(cè)試)

試劑: 20 mL 5 x 濃縮試劑    標(biāo)準(zhǔn)品: 1 mL 1.0 mg/mL BSA

儲(chǔ)藏條件：室溫運(yùn)輸 。試劑和標(biāo)準(zhǔn)品分別在室溫和 -20°C 下保存。

預(yù)防措施：本產(chǎn)品僅供研究用。使用過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)安全措施。

試劑準(zhǔn)備:

按如下比例配制足量的工作試劑。按1：5比例將 5x 試劑用蒸餾水稀釋?zhuān)F(xiàn)配現(xiàn)用。使用前放置至室溫。

96孔板測(cè)試步驟: 

1. 按照下表比例稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。取透明平底96孔板，將10 mL 稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和稀釋的樣品放入不同孔中。將稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品在 -20°C 保存?zhèn)溆谩?/span>

2. 加入 200 mL 工作試劑，輕敲孔板使其混合。

3. 在595nm（570-630nm）處讀取吸光度。

比色皿測(cè)試步驟:

1. 照上述辦法制備標(biāo)準(zhǔn)品。將20 mL 稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和20 mL 稀釋的樣品 加入比色皿。

2. 加入 1000 mL工作試劑并輕敲使其混合 。

3. 在595nm（570-630nm）處讀取吸光度。

濃度計(jì)算

從標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)值中減去空白對(duì)照（水, 8號(hào)）的測(cè)值，繪制DOD與標(biāo)準(zhǔn)濃度的曲線(xiàn)。用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定樣品的蛋白質(zhì)濃度。

實(shí)驗(yàn)必需品（未提供）

吸液用儀器及配件。透明平底96孔板，吸光度分析儀; 比色皿和分光光度計(jì)。

備注

如果蛋白質(zhì)濃度 > 1 mg/mL, 用蒸餾水稀釋樣品, 以標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍內(nèi)的吸光度值計(jì)算樣品的蛋白質(zhì)濃度。試劑和樣品混合后盡快讀出吸光度的值。

高靈敏度測(cè)試：將50 mL 樣品 加入 200 mL 工作試劑可提高測(cè)試的靈敏度 (測(cè)試范圍 3 – 200 mg/mL).  

         標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（96孔板）

上圖: 標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試； 下圖: 50 mL 樣品 加 200 mL 試劑

論文發(fā)表

1. Sharifuzzaman, S.M. and  Austin, B. (2009). Kocuria SM1 controls vibriosis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum). J Appl Microbiol. 108(6): 2162 – 2170.

2. Stefanidis A., et al. (2009). The role of thermogenesis in antipsychotic drug-induced weight gain. Obesity (Silver Spring). 17(1):16-24.

3. Verty, A.N. et al. (2009). The effects of rimonabant on brown adipose tissue in rat: implications for energy expenditure. Obesity (Silver Spring). 17(2):254-61.