ELISA試劑盒檢查體系可謂是免疫學反響應用到科研出產中zui為靈敏的技術手段。自個也為此煩惱過很長一段時間，跟著自個技術水平得前進，或多或少地也掌握了ELISA體系的脾氣，也是游刃有余吧，現在做方陣，做ELISA已是駕輕就熟了，曾經檢查一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的，現在給我十個八個的從包被到顯色，一個工作日根本搞定。但是在新老手操作過程中老是會泛起或大或小的標題，本人在剛開始做ELISA時就面臨良多災題，固然有師兄師姐鋪路，但仍是常常做得烏煙瘴氣，比如說花板，假陽性，全顯色，悉數顯色，顯色比空缺還低。
  ELISA試劑盒包被原的性質很主要，蛋白濃度，是否降解，這關系到你做出的抗體可不能夠被其辨認，所以保留抗原很主要，我做重組蛋白時，師兄都嚴厲正告我必定要在冰浴下緩慢消融即是這個道理。封閉即是讓很多不相關的蛋白質充填這些曠地閑暇，然后排擠ELISA后的過程中攪擾物質的再吸附。但有時由于實驗的需求，包被原的特殊性也也許選用中性的緩沖溶液來包。
  常用封閉劑有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明膠；脫脂奶粉，比較價廉，能夠高濃度運用（5%－10％）；還有一些稀有用到的各種動物血清（首要為了掃除類似蛋白攪擾）和酪蛋白等等。具體的實驗還要有鞏固的理論外也要實習，看一下*可不能夠應用到自個實驗當中去。但*選用啥，要依據實驗具體來實習。應留心以下原理：由于蛋白質與聚苯乙烯固相載體是經過物理吸附的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的作用，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常富含更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯后才干固定在固相載體上。還有有的包被原也許不是蛋白，關于生物素和脂類物質或小分子物質我們要事前對其改造再加以包被，親和素生物素:先親和素先包被載體，參加生物素化的DNA，這種包被辦法平均、牢固，已擴展應用于各種抗原物質的定量測定。常用的包被液除了剛才說到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
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