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無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒
| 目錄號(hào) | 包裝 | 價(jià)格 | 產(chǎn)地 |
| | 10次 | 400元 | Solarbio |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合核酸的硅基質(zhì)膜和堿裂解法提取細(xì)菌質(zhì)粒DNA，從50-100ml大腸桿菌LB培養(yǎng)液中，可快速提取200-300μg純凈地高拷貝質(zhì)粒DNA。所采用的內(nèi)毒素清除劑能有效地去除質(zhì)粒溶液中的內(nèi)毒素，純化的質(zhì)粒內(nèi)毒素含量小于0.1EU/ug。吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料能、專一地吸附DNA，可大限度去除雜質(zhì)蛋白質(zhì)及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學(xué)試驗(yàn)，包括酶切、PCR、測(cè)序、連接、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)染等試驗(yàn)。本試劑盒無(wú)需使用酚、氯仿等有毒試劑，操作安全。
產(chǎn)品包裝：
| 試劑盒組成 | 10次 | 儲(chǔ)存條件 |
| RNase A | 750ul | -20℃ |
| 溶液P1 | 50ml | RT |
| 溶液P2 | 100ml | RT |
| 溶液P3 | 75ml | RT |
| 結(jié)合液 | 125ml | RT |
| 內(nèi)毒素清除劑 | 25ml | RT |
| 漂洗液 | 15ml×2 | RT |
| 洗脫液 | 30ml | RT |
| 過濾柱 | 10個(gè) | RT |
| 吸附柱 | 10個(gè) | RT |
| 收集管 | 20個(gè) | RT |
| 說明書 | 1份 | RT |
注意事項(xiàng)：
1、溶液P1在使用前先加入RNaseA（將試劑盒中提供的RNaseA全部加入），混勻，置于2-8℃保存。
2、*次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在漂洗液中加入無(wú)水乙醇配制成工作液（如向15ml的漂洗液中加入60ml的無(wú)水乙醇）。
3、使用前請(qǐng)先檢查溶液P2和溶液P3是否出現(xiàn)混濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，待溶液恢復(fù)澄清后再使用。溶液P2、溶液P3和漂洗液使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子，如非指明，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心。
4、如果是提取革蘭氏陽(yáng)性菌質(zhì)粒，必須在裂解細(xì)胞前破細(xì)胞壁，方法如下：收集適量菌體，加入5ml溶液P1，充分懸浮菌體，加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml，37℃處理30min左右。加入溶菌酶的濃度和處理時(shí)間可根據(jù)不同的菌株和具體試驗(yàn)條件進(jìn)行調(diào)整。
5、洗脫緩沖液的體積好不少于1ml，體積過小會(huì)影響回收效率；洗脫液的pH值對(duì)洗脫效率也有影響，若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右（可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍），pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。
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