流式檢測(cè)—抗體的選擇

    1.流式抗體的選擇
    流式實(shí)驗(yàn)一般選擇直接標(biāo)記，如沒(méi)有帶熒光標(biāo)記的一抗，則需要一抗+熒光二抗搭配
    常用熒光素：FITC，PE，PE-Cy5為目前流式細(xì)胞儀的常用熒光染料
    熒光素的搭配主要由3個(gè)因素決定

    1)流式細(xì)胞儀能檢測(cè)多少個(gè)通道：
    標(biāo)配的FACSCalibur只有一根488nm的激光，能做FL1、FL2、FL3三個(gè)熒光通道/三個(gè)顏色；
    而選配的Calibur配有488nm和635nm兩根激光，可以檢測(cè)FL1-FL4四個(gè)通道。

    2)需要同時(shí)檢測(cè)多少個(gè)指標(biāo)：
    一般3個(gè)或4個(gè)，常用的搭配是FITC(FL1)+PE(FL2)+PerCP(FL3)+APC(FL4)

    3)廠家的抗體有多少種熒光標(biāo)記

    2.同型對(duì)照的選擇
    一般選擇與一抗的成分*相同種屬來(lái)源、相同亞型和亞鏈、相同熒光標(biāo)記的抗體，如抗人的CD56APC標(biāo)記的抗體，MouseIgG,k；則同型對(duì)照是APC標(biāo)記的MouseIgG,k。
    如果是純化的抗體+熒光標(biāo)記二抗，那么應(yīng)該選擇一抗的同型對(duì)照。

    3.目標(biāo)客戶群
    流式檢測(cè)平臺(tái)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室

關(guān)鍵詞：流式檢測(cè) ELISA檢測(cè) 抗體 抗原 標(biāo)記抗體 遠(yuǎn)慕 試劑