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實(shí)驗(yàn)室ELISA試劑盒配制標(biāo)準(zhǔn)品的方法原理和步驟分析

來源:通蔚試劑(上海)有限公司   2016年12月21日 10:33  

據(jù)我公司ELISA試劑盒技術(shù)分析,NaOH有很強(qiáng)的吸水性和吸收空氣中的CO2,因而,市售NaOH中常含有Na2CO3。由于碳酸鈉,對(duì)指示劑的使用影響較大,應(yīng)設(shè)法除去。
除去Na2CO3zui通常的方法是將NaOH先配成飽和溶液,由于Na2CO3在飽和NaOH溶液中幾乎不溶解,會(huì)慢慢沉淀出來,因此,可用飽和溶液,配制不含Na2CO3的NaOH溶液。待Na2CO3沉淀后,可吸取一定量的上清液,稀釋至所需濃度即可。此外,用來配制NaOH溶液的蒸餾水,也應(yīng)加熱煮沸放冷,除去其中的CO2。
標(biāo)定堿溶液的基準(zhǔn)物質(zhì)很多,常用的有草酸、苯甲酸和鄰苯二甲酸氫鉀等,zui常用的是鄰苯二甲酸氫鉀。計(jì)量點(diǎn)時(shí)由于弱酸鹽的水解,溶液呈弱堿性,應(yīng)采用酚酞作為指示劑。
ELISA試劑盒配制的所需物品:
1、儀器:堿式滴定管(50ml)、容量瓶、錐形瓶、分析天平、臺(tái)秤。 
2、試劑:鄰苯二甲酸氫鉀、固體、10g/L酚酞指示劑:1g酚酞溶于適量乙醇中,再稀釋至100mL。 
操作步驟 
1、0.1mol/L NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 
用小燒杯在臺(tái)秤上稱取120g固體NaOH,加100mL水,振搖使之溶解成飽和溶液,冷卻后注入聚乙烯塑料瓶中,密閉,放置數(shù)日,澄清后備用。 
準(zhǔn)確吸取上述溶液的上層清液5.6mL到1000毫升無二氧化碳的蒸餾水中,搖勻,貼上標(biāo)簽。 
2、0.1mol/L NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液的標(biāo)定 
ELISA試劑盒將基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀加入干燥的稱量瓶?jī)?nèi),于105-110℃烘至恒重,用減量法準(zhǔn)確稱取鄰苯二甲酸氫鉀約0.6000克,置于250 mL錐形瓶中,加50 mL無CO2蒸餾水,溫?zé)崾怪芙?,冷卻,加酚酞指示劑2-3滴,用欲標(biāo)定的0.1mol/L NaOH溶液滴定,直到溶液呈粉紅色,半分鐘不褪色。同時(shí)做空白試驗(yàn),要求做三個(gè)平行樣品。

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