ELISA試劑盒的培育現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于產(chǎn)前遺傳學(xué)確診,但其生物學(xué)性狀和在體內(nèi)的來源仍沒有*清晰。羊水中包含了多種異質(zhì)細(xì)胞群,這些細(xì)胞首要來源于胎兒的肌膚,胎兒的消化器官、呼吸器官和尿道,以及羊膜上皮。間充質(zhì)干細(xì)胞( MSCs) 是干細(xì)胞家族的主要成員,來源于發(fā)育前期的中胚層和外胚層。MSCs 開始在骨髓中發(fā)現(xiàn),因其具有多向分解潛能、造血支撐和推進(jìn)干細(xì)胞植入、免疫調(diào)控和自我仿制等特色而日益遭到大家的重視。
ELISA試劑盒均有成功別離羊水來源干細(xì)胞的報(bào)導(dǎo),大多是運(yùn)用羊水細(xì)胞貼壁的特色經(jīng)過屢次傳代的辦法取得干細(xì)胞。Tsai MS 等選用兩步培育法從孕中期羊水中成功別離出具有MSCs 特征的干細(xì)胞。隨后De Coppi 等經(jīng)過免疫磁珠辦法別離出c - Kit ( CD117) 陽性細(xì)胞,這些細(xì)胞在體外增殖敏捷,能夠構(gòu)成安穩(wěn)的細(xì)胞系,他將這些細(xì)胞命名為羊水干細(xì)胞。此外經(jīng)過克隆化培育的辦法也能夠從羊水中取得干細(xì)胞。從現(xiàn)有研討情況看來,現(xiàn)在尚未構(gòu)成共同的羊水干細(xì)胞培育系統(tǒng)。
ELISA試劑盒選用貼壁法別離取得羊水細(xì)胞,培育細(xì)胞運(yùn)用低糖DMEM 培育基。搜集的20 例羊水標(biāo)本中有17 例原代培育成功,并取得能夠持續(xù)傳代的安穩(wěn)細(xì)胞系。培育的羊水細(xì)胞體外增加敏捷,倍增時(shí)刻約36h。流式細(xì)胞儀檢查顯現(xiàn)細(xì)胞表達(dá)CD29、CD44、CD105 等間充質(zhì)干細(xì)胞外表象征,不表達(dá)造血干細(xì)胞外表象征CD45 和CD133。RT - PCR 的結(jié)果標(biāo)明別離取得的干細(xì)胞表達(dá)Oct - 4 和Nanog 基因,且不一樣代的細(xì)胞間均有表達(dá)。Oct - 4 和Nanog 被認(rèn)為是干細(xì)胞多能分解的首要調(diào)理因子,干細(xì)胞分解后其表達(dá)當(dāng)即下調(diào)。以上結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)共同,標(biāo)明羊水細(xì)胞經(jīng)體外培育擴(kuò)增能夠得到具有MSCs 性質(zhì)的干細(xì)胞。
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