ELISA試劑盒試驗成功的條件是樣本的準(zhǔn)確處理加上試驗途中準(zhǔn)確的操作，準(zhǔn)確的處理樣本是確保ELISA查看的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性的*步。一般咱們可用于ELISA查看的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或安排勻漿液等，不一樣類型的查看樣本前期。準(zhǔn)確的處理樣本是確保ELISA查看的準(zhǔn)確性和準(zhǔn)確性的*步，下面就簡略介紹一下不一樣類型的樣本的處理辦法。
1、  血清
血清是zui常用于ELISA查看試劑盒的一類樣本，處理也比較簡略。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管收集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時或4℃放置一晚，使血清分出。（將試管或離心管歪斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的分出。）4℃ 1000×g離心20分鐘，細(xì)心收集上清。主張將血清分裝多份，-20℃或-80℃保留，防止重復(fù)凍融。
采血過程中應(yīng)防止溶血，由于紅細(xì)胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì)，在以HRP為符號的ELISA查看試劑盒中會有非特異性的顯色，而致使查看的不準(zhǔn)確性。一起也應(yīng)防止細(xì)菌污染，由于菌體內(nèi)也許富含內(nèi)源性的HRP然后致使查看的假陽性。
2、  血漿
ELISA試劑盒用含抗凝劑的采血管或離心管收集血液標(biāo)本，標(biāo)本收集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min，取上清即血漿。將上清分裝多份，-20℃或-80℃保留，防止重復(fù)凍融。防止運用溶血或高血脂的標(biāo)本。
常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等，查看時還應(yīng)細(xì)心閱讀試劑盒說明書，查看試劑盒是不是對抗凝劑有特殊要求。
3、  細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管，1000×g離心20min，除掉細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，取上清，-20℃或-80℃保留，防止重復(fù)凍融。
4、  尿液、唾液等別的液體生物樣本
1000×g離心20min，取上清即可查看。
總的來說，由于ELISA查看試劑盒只能查看可溶性蛋白的含量，所以應(yīng)確保一切樣本均為弄清的液體，沉淀或懸浮物都應(yīng)離心去掉。

ELISA試劑盒運用定性夾心免疫查看技能，用組成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是我國型HEV毒株中心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，別離來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。
ELISA查看試劑盒將樣品或規(guī)范品參加孔中并孵育，假如其間存在HEV IgM抗體，這些抗體就會與HEV 的多肽抗原，并固定在上面，洗板除掉其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。
然后參加羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶物，經(jīng)第2次孵育后，酶物就會與孵育上的HEV IgM抗體相，ELISA試劑盒洗板除掉未的酶物，參加TMB底物溶液，在第三次孵育時會發(fā)作酶-底物反響，ELISA查看試劑盒只要那些富含HEV IgM抗體和酶物所構(gòu)成的復(fù)合物的孔才會發(fā)作顏色變化，參加硫酸溶液停止酶和底物間的反響，ELISA試劑盒并在波長: 450nm處測量O.D.值,依照本HEV IgM抗體elisa試劑盒的測驗規(guī)范, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。