在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶物后。ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗的機(jī)會(huì)，只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。    

我公司技術(shù)員提到：這是一個(gè)逐漸平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)分散才干到達(dá)反響的結(jié)尾。在這以后參加的酶符號(hào)抗體與固相抗原的也相同如此。這即是為何ELISA反響老是需求必定時(shí)刻的溫育。    

溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體的適宜溫度。在樹立ELISA辦法作反響動(dòng)力學(xué)研討時(shí)，實(shí)驗(yàn)標(biāo)明，兩次抗原抗體反響通常在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。    

為加速反響，可進(jìn)步反響的溫度，有些實(shí)驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜選用更高的溫度。抗原抗體反響4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反響在冰箱中放置一晚，以構(gòu)成zui多的沉積。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng)，在ELISA中通常不予選用。    

若用保溫箱，ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性杰出的資料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui終將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)則的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)分更應(yīng)如此。無論是水浴仍是濕盒溫育，反響板均不宜疊放，以確保各板的溫度都能敏捷平衡。    

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