使用Molecular Devices發(fā)布SoftMax Pro 7軟件進(jìn)行平行線分析和相對活性評價
在生物實驗中要經(jīng)常要使用到的平行線分析(PLA)方法,當(dāng)無法直接檢測一個生物制品的活性而只能通過檢測其產(chǎn)生的效果時,PLA方法通常會被用來進(jìn)行效應(yīng)曲線的比較來獲得此制品的效果(Figure1)。如果對于兩種物質(zhì)其生物響應(yīng)相似或者在兩種不同的生物環(huán)境中同一種物質(zhì)產(chǎn)生相似的效應(yīng)曲線時,平行線分析法可以被用來進(jìn)行評價。評價平行性是計算化合物或藥物相對活性的前提,并且在很多生物應(yīng)用中如藥物活性比較、分析物鑒定、交叉反應(yīng)、干擾物質(zhì)、基質(zhì)補償、濃度估算和抑制效應(yīng)等應(yīng)用研究中。
當(dāng)兩條曲線被判定為平行時,其中一條曲線的函數(shù)可以通過通過另一條曲線的函數(shù)乘上一個比例系數(shù)向X軸的左邊或右邊變換獲得:ƒ(x) = ƒ(rx), 其中x是劑量,r是比例系數(shù)或相對活性。對于相對活性,一般將參考品(已知品)的活性設(shè)為1,可以使用一個比例系數(shù)可以將參考品的曲線變換為測試品(未知品)曲線,那么這比例系數(shù)則被稱之為測試品的相對活性。這個方法應(yīng)用于線性擬合的曲線非常合適,因為線性擬合的曲線在整個濃度范圍內(nèi)的曲線斜率是保持一致的(Figure2)??墒菍τ诜蔷€性擬合曲線如4-參數(shù)和5-參數(shù)曲線,S形的濃度效應(yīng)曲線在整個測試濃度范圍內(nèi)具有變話的斜率值(Figure1)。
用于評價平行性的方法根據(jù)平行性假設(shè)的驗證方法不同大致可以分為兩大類:效應(yīng)比較法和參數(shù)比較法。本文將對這兩大類方法進(jìn)行詳細(xì)解釋和介紹怎樣使用SoftMax® Pro 7軟件進(jìn)行平行性測試。我們建立了一個Protocol包括了使用F-檢驗進(jìn)行F-檢驗概率測試和使用卡芳-檢驗進(jìn)行卡芳概率測試。另外,對于參數(shù)比較法,根據(jù)菲勒定理我們也建立了一個Parallelism Test 的protocol放在SoftMax Pro Protocol的庫內(nèi)。所有這些方法都可以被用于評價線性和非線性擬合曲線。
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