酶標板在酶聯(lián)免疫吸附實驗中,參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。包被酶標版所用的抗體量,我們是可以用公式計算出來的。公式:V=5n/a(單位:ul),a:抗體濃度,n:酶標板數(shù)量。
做ELISA實驗時,大家都知道樣本要進行一定比例的濃度稀釋,且稀釋太低或太高都會導致線性關系就不理想,結(jié)果也就不準了。那么,如何從標準曲線中通過樣本的吸光度計算樣本中的蛋白含量?方法很簡單,只需三步驟,輕輕松松搞定。
1 設立標準品,以不同濃度標準品的吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標建立坐標系,求出曲線方程y=ax+b,
2 得出回歸方程 x=(y-b)/a
3 所得樣品吸光度代入方程即可取得所檢測的濃度
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