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ELISA是以免疫學(xué)反響為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反響與酶對(duì)底物的催化作用相起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技能。免疫酶技能是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上，構(gòu)成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原，稱為酶物。該酶物的酶在免疫反響后，作用于底物使之呈色，依據(jù)色彩的有無(wú)和深淺，定位或定量抗原/抗體。
ELISA法是免疫酶技能的一種，其特點(diǎn)是使用聚苯乙烯微量反響板(或球)吸附抗原/抗體，使之固相化，免疫反響和酶促反響都在其間進(jìn)行。在每次反響后都要重復(fù)洗刷，這既確保了反響的定量關(guān)系，也避免了末反響的游離抗體/抗原的別離進(jìn)程。在ELISA法中。酶促反響只進(jìn)行一次，而抗原、抗體的免疫反響可進(jìn)行一次或數(shù)次，即可用二抗(抗抗體)、三抗再次進(jìn)行免疫反響。
現(xiàn)在常用的幾種ELISA方法有：測(cè)定抗體的直接法，測(cè)定抗原的雙抗體夾心法和測(cè)定抗原的競(jìng)爭(zhēng)法等。本試驗(yàn)選用直接法測(cè)定單克隆抗體效價(jià)。其主要進(jìn)程為：首先將已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反響板的凹孔內(nèi)，加待測(cè)抗體，保溫后洗刷以除掉未的雜蛋白質(zhì)，加酶標(biāo)抗抗體，保溫后洗刷，加底物保溫30分鐘后，加酸或堿停止酶促反響，用目測(cè)或光電比色測(cè)定抗體含量。
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