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氣泡對牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實驗結(jié)果的影響

來源:上海谷研生物化學研究所   2017年09月14日 11:36  

在做牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒實驗的過程中,加樣時難免會出現(xiàn)氣泡。通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應不均一。在做實驗的過程中,有時為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產(chǎn)生氣泡,那么氣泡對ELISA實驗結(jié)果會有什么影響呢?

   1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內(nèi)反應不均一。
   2.包被時有氣泡的話,將導致包被不*實際包被量下降--弱陽性甚至假陰性。
   3.封閉時有氣泡的話,將導致大量未結(jié)合位點的存在,引起非特異性結(jié)合--本底增高,假陽性。
   4.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性。
   5.加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽性甚至假陰性(競爭法相反----假陽性)。
   6.加顯色液時有氣泡的話---顯色不*。
   7.加終止液時有氣泡的話(1、不能*終止反應 2、影響酶標儀比色,OD值增高)
   8.洗滌時有氣泡的話,非特異性結(jié)合物不能*洗去,做無用功。

避免方法:
   1、加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。
   2、牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒封閉時一定要加滿孔。
   3、洗滌時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來zui終驅(qū)除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。
間甲酚/3-甲酚    1ml    CDCU-1546900    聚對苯二甲suan乙二醇酯樹脂(PET...    3 Strips    CDCP-F987JS-1ml
間甲酚(標準品)    1g    CDCU-1547903    聚乙二醇硬脂suan酯 標準品    200mg    CDAB-442391
間甲酚(108-39-4)    5g    CDCU-1546853    聚乙二醇    100mg    CDCP-F987-5g
間二硝基苯    1mL    CDCT-C17834500    lv化三乙基qian 標準品    純品型,有證書,0.1g    M-8330-01
間二甲苯    5000mg/L;2x5ml    CDGG-020139-01    一溴甲烷    2000mg/L;1ml    CDGG-020193-05-10
甲醛 and 乙醛2,4-二硝基...    10ml    CDDM-C261500-50mg    頭孢匹林    50mg    CDGG-110424-01
甲萘威/呋喃丹混標 標準品    1000mg/L于甲醇,1ml    CDGG-032199-10    殺螨酯    10mg/L;1ml    CDGG-131464-01-1ml
甲基毒死蜱    1000mg/L;1ml    CDGG-031004-01    嗪草酮/草克凈 標準品    1000mg/L于甲醇,1ml    CDGG-031080-02
牛流行性腹瀉病毒PCR-熒光探針試劑盒

 

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