人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒
人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒北京方程生物公司現(xiàn)貨供應(yīng)
英文名稱:elisa試劑盒
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒的含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒水平。用純化的人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒 ,再與 HRP標(biāo)記的人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒呈正相關(guān)。 用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度 (OD值) ,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒濃度。
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樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人熱休克蛋白β7(英文簡(jiǎn)寫(xiě):HSPβ7)ELISA試劑盒
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