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ELISA試劑盒樣本處理五部曲助您精彩實(shí)驗(yàn)

來源:研域生物技術(shù)(上海)有限公司   2017年11月01日 09:44  

ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)中要害的一步,稍有不小心將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)滿盤皆輸,怎么安全,方便的處理樣本,樣本處理五部曲助您精彩實(shí)驗(yàn)。

一, 均質(zhì)
安排樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)重復(fù)絞碎,混合均勻。
水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;質(zhì)料外表較臟時,需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充沛混勻。
生果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除掉外表的水分,取食用部分。

二, 振動提取
將提取溶劑參加到裝有樣品的具塞容器中,振動,使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充沛觸摸以深化到樣本安排內(nèi)部,提取待測組分。
1振動辦法:振動器上進(jìn)行上下、往復(fù)式振動、手搖式上下振動。
2 在安排樣本中參加有機(jī)溶劑之間提取時,應(yīng)邊加邊振動,防止安排凝聚成團(tuán),不利于提取。

三, 在用有機(jī)溶劑提取進(jìn)程中,如果呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,處理的辦法有:①用細(xì)頭悄悄的拌和,損壞乳化后,再重復(fù)離心。②再參加適量的提取劑,從頭振動。留意離心后要確保樣本的稀釋倍數(shù)不變。

四, 濃縮
因?yàn)閮艋M(jìn)程中引進(jìn)的溶劑,可能會下降待測組分的濃度或許不適宜直接剖析,需要去除悉數(shù)有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈?,小鼠elisa試劑盒再用復(fù)溶液溶解干燥殘留物。

留意:
1、在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。
2、在吹樣本時,針頭應(yīng)在液面上空,防止與樣本觸摸,防止發(fā)生穿插污染。
3、樣本吹干后應(yīng)立即取下,防止吹的時刻過長,影響*終檢測成果。
4、不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
5 、凈化

通過提取的待測組分中一般含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或許是含有與待測物結(jié)構(gòu)類似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的進(jìn)程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理辦法中涉及到的*常見的凈化是:液液分配法。
比方:用復(fù)溶液溶解干燥殘留物之前先參加適量的正己烷,在參加正己烷和復(fù)溶液渦動后如果呈現(xiàn)乳化現(xiàn)象,能夠60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或削弱后,加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。

 

溫馨提示Elisa實(shí)驗(yàn)運(yùn)用留意事項(xiàng):
1、小鼠ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、濃洗刷液可能會有結(jié)晶分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗刷時不影響成果
3、各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校正其準(zhǔn)確性,以防止實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時刻控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦運(yùn)用排槍加樣。
4、請每次測定的一起做規(guī)范曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔孔OD值的),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,核算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5、嚴(yán)格按說明書的操作進(jìn)行,實(shí)驗(yàn)成果判定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
6、本試劑不同批號組分不得混用。
7、封板膜只限一次性運(yùn)用,以防止穿插污染。
8、所有樣品,洗刷液和各種廢棄物都應(yīng)按感染物處理。
9、底物請避光保存。

 

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