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PicoPLEX WGA Kit 單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒常見問題

來源:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司   2017年11月06日 17:22  

1.推薦加樣量

1-10個人類細(xì)胞(如:卵裂球,極體,滋胚層細(xì)胞,羊水細(xì)胞,循環(huán)腫瘤細(xì)胞,培養(yǎng)細(xì)胞)

1000-10000個細(xì)菌細(xì)胞

不完整或片段化,單/雙鏈DNA

2.PicoPLEX® 單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒推薦應(yīng)用?

PicoPLEX單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒用于:

CNV拷貝數(shù)變異:寡核苷酸和細(xì)菌人工染色體的微陣列比較基因組雜交(oligonucleotide and BAC aCGHa)

單核苷酸多態(tài)性分型SNP

PCR法基因突變篩查

3.使用PicoPLEX WGA Kit前,可以用什么緩沖液洗滌單細(xì)胞?

一些客戶成功使用加了PVA(聚乙烯醇,例:0.1%)的PBS洗滌收集細(xì)胞。另外,注意洗滌/收集緩沖液(PBS)不要含鈣、鎂離子。

4.流式分選有什么特殊要求嗎?

Yes, we strongly recommend not fixing, and using light scattering or phase contrast to sort or collect samples. Microscopic/visual confirmation of successfully sorted cells can be used to optimize sorting conditions.

5.PicoPLEX WGA Kit的加樣體積?

每次反應(yīng)5 μl 加樣體積(細(xì)胞和緩沖液總體積不超過2.5 μl)。

6.單細(xì)胞全基因組擴增產(chǎn)物能直接用于NGS嗎?

不能。

3.那么有其他能直接應(yīng)用NGS的單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒嗎?

有。PicoPLEX DNA-seq直接應(yīng)用Illumina NGS。

8.What is the expected genomic locus representation and Loss of Heterozygosity (LOH) for PicoPLEX WGA products?

For reference purposes, see the data obtained from a third party in the table below.

SNP Genotyping Method

Single-Cell Amplification Success Rate

SNP Call Rates

LOH

PCR

95%

> 95%

< 10%

Illumina Infinium SNP array

95%

50% – 60%

7% – 12%

9.單細(xì)胞全基因組擴增技術(shù)的終產(chǎn)物是單鏈還是雙鏈DNA?

產(chǎn)物是單雙鏈DNA的混合物。

 

PicoPLEX WGA Kit 單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒問答英文版

1. What are the recommended DNA inputs for the PicoPLEX WGA Kit?

1 – 10 human cells (e.g. blastomeres, polar bodies, trophoblastic cells, amniocytes, CTCs, cultured cells

1,000 – 10,000 bacterial cells

Intact or fragmented, single- or double-stranded DNA

 

2.What applications are recommended for PicoPLEX® WGA Kit?

This kit is used for:

Copy number variation (CNV) analysis: superior for oligonucleotide and BAC aCGH(Bacterial Artificial Chromosome Array-based comparative genomic hybridization)

SNP genotyping

Mutation detection by PCR

 

3.  Is there a non-stick wash buffer that can be used for single cell wash prior to using PicoPLEX WGA Kit?

This has not been validated at Rubicon Genomics, but some customers have successfully used PVA (Polyvinyl Alcohol; e.g. 0.1%) in PBS to wash/collect their cells. Additionally, your washing/collecting buffer (PBS) must be also Ca- and Mg-free.

 

4.  Are there special requirements for flow sorting?

Yes, we strongly recommend not fixing, and using light scattering or phase contrast to sort or collect samples. Microscopic/visual confirmation of successfully sorted cells can be used to optimize sorting conditions.

5.  What is the sample input volume for PicoPLEX WGA Kit?

This kit will accommodate a 5 μl sample input volume per reaction (with a maximum of 2.5 μl of cell & buffer carryover).

6.  Can the product of PicoPLEX WGA Kit be taken straight to NGS?

No.

7.  Does Rubicon Genomics have an NGS-ready kit for single cell applications?

Yes,PicoPLEX DNA-seq can be used with Illumina NGS platforms.

8.  Sigma-Aldrich sells a GenomePlex WGA kit, is it the same technology as PicoPLEX WGA? 

No, PicoPLEX uses different technology.

9.  What is the expected genomic locus representation and Loss of Heterozygosity (LOH) for PicoPLEX WGA products?

For reference purposes, see the data obtained from a third party in the table below.

SNP Genotyping Method

Single-Cell Amplification Success Rate

SNP Call Rates

LOH

PCR

95%

> 95%

< 10%

Illumina Infinium SNP array

95%

50% – 60%

7% – 12%

10.  Is the product of this technology single- or double-stranded?

The end product of PicoPLEX WGA is a mixture of single- and double-stranded DNA.

 

PicoPLEX WGA Kit 單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒問答英文版摘自Rubicon,中文版由紅榮微再翻譯整理。

 

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RB3050 Rubicon PicoPLEX WGA Kit 單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒

PicoPLEX WGA Kit采用技術(shù),設(shè)計優(yōu)化用于從單細(xì)胞中擴增基因組DNA。起始樣本量低至單細(xì)胞或6pg基因組DNA。便捷的單管操作流程降低污染節(jié)省時間。結(jié)果穩(wěn)定性、重復(fù)性好。

PicoPLEX WGA Kit適用array CGH分析PCR平臺。PicoPLEX技術(shù)IVF供應(yīng)商如BlueGnome信賴并用于PGS,BlueGnome CGH也是中國福利會和平婦幼保健院所用的PGS平臺。


產(chǎn)品訂購信息

貨號

產(chǎn)品名稱

包裝

RB3050/R30050

 PicoPLEX WGA Kit單細(xì)胞全基因組擴增試劑盒,array CGH、PCR分析用

50次反應(yīng)

RB3381/R300381

PicoPLEX DNA-seq Kit,48種雙端illumina引物

48

 

 

紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司以“傳遞科學(xué)價值,服務(wù)科學(xué)研究”為宗旨,主營:干細(xì)胞、醫(yī)療、細(xì)胞治療、器官再生 四大板塊的產(chǎn)品。

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