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過氧化物酶染色液(聯(lián)苯胺法)說明書中文版

來源:上海銘博生物科技有限公司   2017年12月28日 11:03  

過氧化物酶染色液(聯(lián)苯胺法)說明書中文版

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

過氧化物酶(Peroxidase,簡(jiǎn)稱POX或MPO)是由微生物或植物所產(chǎn)生的一類能催化很多反應(yīng)的以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶氧化還原酶,主要存在于細(xì)胞的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。

 過氧化物酶染色液(聯(lián)苯胺法)是ICSH推薦采用的POX染色液,其原理是細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶能將無色的3,3-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)的氫原子傳遞給過氧化氫,使前者催化成有色染料沉積在細(xì)胞質(zhì)中的POX所在部位。該染液可用于血液、骨髓或細(xì)胞涂片過氧化物酶染色, POX活性部位呈棕黃色。

產(chǎn)品組成:

                       編號(hào)

名稱

MX0081

4×10ml

MX0081

4×20ml

Storage

試劑(A): BFA固定液

10ml

20ml

4℃ 避光

試劑(B):

POX孵育液

B1: DAB染色液

10ml

20ml

4℃ 避光

B2: DAB氧化劑

2×100μl

4×100μl

RT

臨用前,按B1:B2=1000:1比例混合,即為POX孵育液,即配即用。

試劑(C): WG染色液

10ml

20ml

RT 避光

試劑(D): WG buffer

10ml

20ml

RT

使用說明書

1份

 

自備材料:

載玻片

顯微鏡 

操作步驟(僅供參考)

血液、骨髓或細(xì)胞涂片滴加預(yù)冷的BFA固定液,4℃固定30~60s,稍水洗。

2、滴加配制好的POX孵育液,室溫(20~25℃)避光孵育10~15min,水洗2min。

3、滴加WG染色液,孵育30~60s。

4、直接滴加等量WG buffer,染色10~15min。

5、水洗、晾干、鏡檢。

染色結(jié)果: 

POX活性部位

棕黃色

細(xì)胞核

藍(lán)色

粒細(xì)胞系除早期原粒細(xì)胞陰性外,分化好的原粒細(xì)胞以下階段細(xì)胞隨細(xì)胞成熟而陽性反應(yīng)增強(qiáng),衰老中性粒細(xì)胞反應(yīng)程度減弱單核細(xì)胞系弱陽性,淋巴細(xì)胞系為陰性。漿細(xì)胞及巨核細(xì)胞均為陰性。嗜酸性粒細(xì)胞和Auer小體呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。

陽性反應(yīng)強(qiáng)度的判斷:

陰性

無顆粒

弱陽性

顆粒小,分布稀疏

陽性

顆粒略粗,分布密集

強(qiáng)陽性

顆粒粗大,呈藍(lán)黑色,充滿胞漿

 

臨床意義:

急性粒細(xì)胞白血病晚期的原粒細(xì)胞呈陽性,顆粒較少且大。

急性單核白血病細(xì)胞呈陰性或弱陽性,顆粒小且稀疏。

單核急性白血病呈陰性或弱陽性。

急性早幼粒白血病呈強(qiáng)陽性,某些早幼粒細(xì)胞呈陽性,惡性組織細(xì)胞呈陰性。

急性淋巴細(xì)胞白血病呈陰性。 

注意事項(xiàng):

血液或骨髓涂片應(yīng)新鮮,薄厚適宜,及時(shí)固定,否則會(huì)影響酶的活性。

POX孵育液易失效或降低陽性強(qiáng)度,即配即用,不宜久置。

樣本在未染色前切勿接觸氧化劑類物質(zhì),以免細(xì)胞內(nèi)的過氧化物酶被抑制。

每次染色時(shí),應(yīng)采取健康人末梢血或骨髓涂片作為陰性對(duì)照。

為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 6個(gè)月有效。

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