自然界中ATCC菌種種類繁多,其裂菌功能在針對細(xì)菌耐藥方面具有潛在應(yīng)用價值。不同噬菌體也呈現(xiàn)出顯著的基因多樣性及宿主特異性。從上海某豬場仔豬腸內(nèi)容物樣品中分離、純化大腸桿菌的裂解性噬菌體,分析其生物學(xué)特性和病毒學(xué)特征,為探索應(yīng)用噬菌體治療細(xì)菌性感染提供研究材料。
【方法】 采用雙層瓊脂平板法分離、純化噬菌體,觀察噬菌斑特征,通過電鏡觀察噬菌體形態(tài)特征,測定其裂菌譜、*感染復(fù)數(shù)、一步生長曲線和生物學(xué)特性,進(jìn)行噬菌體全基因組測序和遺傳進(jìn)化分析。
【結(jié)果】 分離、純化獲得一株能裂解大腸桿菌K-12菌株的噬菌體,命名為vB_EcoS_SH2 (SH2),噬菌斑呈圓形、大而透明、邊緣整齊。電鏡觀察SH2的頭部呈二十面體立體對稱,尾部較長。噬菌體的潛伏期為10 min,暴發(fā)期為60 min,裂解量高達(dá)121 PFU/感染細(xì)胞,其*感染復(fù)數(shù)為0.1?;蚪M測序和比對結(jié)果表明,SH2的核酸類型為dsDNA,基因組全長為49 088 bp,G+C%含量為45%,GenBank登錄號為KY985004,結(jié)合電鏡觀察及BLASTp分析,確定其屬于有尾噬菌體目長尾噬菌體科成員。同源性及進(jìn)化分析表明,該噬菌體為大腸桿菌T1樣噬菌體的新成員。
【結(jié)論】 分離鑒定了一株裂解效率*的大腸桿菌T1樣噬菌體,并確認(rèn)其為T1樣噬菌體新成員,為研究大腸桿菌噬菌體及其抗菌應(yīng)用提供了新的實驗材料。
噬菌體是一種細(xì)菌病毒,在自然界中廣泛存在。噬菌體以細(xì)菌為宿主,影響著細(xì)菌的生態(tài)及進(jìn)化。大多數(shù)噬菌體為有尾噬菌體,具有尾絲蛋白,能特異性識別并結(jié)合宿主菌表面的受體。有尾噬菌體目擁有3個成員,分別是肌尾噬菌體科(Myoviridae)、長尾噬菌體科(Siphoviridae)和短尾噬菌體科(Podoviridae)。比較基因組學(xué)和蛋白組學(xué)分析技術(shù)在揭示噬菌體多樣性及其進(jìn)化關(guān)系,以及噬菌體與宿主菌相互作用關(guān)系中發(fā)揮了重要作用。特別是對噬菌體及其裂菌機(jī)制的研究,對減少抗生素的使用和細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生具有積極作用。近年來,有較多裂解性噬菌體用于細(xì)菌性疾病的預(yù)防和治療、細(xì)菌檢測及生食蔬菜的表面殺菌劑,為開發(fā)噬菌體裂菌制劑展示了廣闊的應(yīng)用前景。
ATCC菌種一般具有種屬特異性甚至菌株特異性,噬菌體尾絲蛋白與細(xì)菌表面受體結(jié)合,介導(dǎo)噬菌體侵入細(xì)菌,從而發(fā)揮裂菌作用,因此,尾絲蛋白和細(xì)菌表面受體決定了噬菌體的裂菌譜。本研究分離到一株裂解能力強(qiáng)大的噬菌體,其對大腸桿菌K-12菌株具有裂解效果,通過對其編碼蛋白的比對分析,推測該噬菌體為T1樣噬菌體。通過對其生物學(xué)特性及基因序列分析,將為進(jìn)一步揭示其裂菌機(jī)制及后續(xù)噬菌體的改造和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
lv丹(工業(yè)級混合物) 綠草定/三lv吡氧乙suan 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031011-02 100mg/L于甲醇,1ml
lv丹(工業(yè)級混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品 100ug/L于異辛烷,1ml 綠草定/三lv吡氧乙suan 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031011-01 1000mg/L于甲醇,1ml
lv丹(工業(yè)級混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品 200ug/L于異辛烷,1ml 禾草敵 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031005-05 100mg/L于甲醇,1ml,
lv丹(工業(yè)級混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品 500ug/L于異辛烷,1ml 禾草敵 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031005-03 200mg/L于甲醇,1ml,
lv丹(工業(yè)級混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品 750ug/L于異辛烷,1ml 禾草敵 標(biāo)準(zhǔn)品 CDGG-031005-02 1000mg/L于甲醇,1ml,
ATCC菌種
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