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科研指南:ELISA試劑盒標(biāo)本處理的技術(shù)問題

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2018年03月01日 11:35  

  在ELISA檢測實驗中,檢測標(biāo)本是影響實驗結(jié)果的關(guān)鍵因素之一。今天上海滬鼎為您分享的內(nèi)容是ELISA檢測試劑盒標(biāo)本處理過程中的技術(shù)問題,希望可以給您的ELISA試劑盒實驗帶來幫助。

一、標(biāo)本溶血
由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性
的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標(biāo)記的ELISA測定中,會導(dǎo)致非特異性顯色,ELISA試劑盒干擾測定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時必須注意避免溶血。

 

二、標(biāo)本受細(xì)菌污染

因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。


三、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定
中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,ELISA試劑盒1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。

 

四、標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響
抗凝劑、酶抑制劑及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有一定干擾作用。

 

  上海滬鼎是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司,公司生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量有保證,含量高,能夠給實驗帶來準(zhǔn)確的結(jié)果。如有需要可我司銷售人員,我們將竭誠為您服務(wù)。

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