測定轉(zhuǎn)化細胞增長數(shù)值常用zui簡便的方法。
一般過程為
1. 接種21 孔/24 孔板細胞(如用培養(yǎng)瓶時則21 瓶)。
2. 分7 組,每組3 孔(或瓶),培養(yǎng)一周(7 天),期間逐日檢測一組,計數(shù)。
3. 把7 天中的細胞數(shù)值繪成圖,即為細胞生長曲線。
實驗材料
細胞
試劑、試劑盒
胰蛋白酶
儀器、耗材
吸管
實驗步驟 1. 懸液制備
取待測生長狀態(tài)良好細胞,增長至接近匯合時,向培養(yǎng)瓶內(nèi)加1 ml升0.25 %胰蛋白酶液,37 ℃溫箱中消化,至細胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養(yǎng)液、輕吹打制備成細懸液、計數(shù);
2. 接種
向每孔中接種等量細胞,置溫箱中培養(yǎng);把培養(yǎng)瓶中營養(yǎng)液倒入試管中并記錄下毫升量;
3. 計數(shù)檢測
從次日起,即開始檢測*組每個孔(或瓶)中的細胞總數(shù),用計算盤或用細胞自動計數(shù)器計數(shù),取3 個孔的均值,如此至第7 組結(jié)束;
4. 繪圖
用座標圖紙繪成生長曲線。
收起
注意事項
1. 計數(shù)法簡便易行,但不夠,約有20 %~30 %的誤差。為提高準確性,每孔也應計算2~3 次,則總和每組計算總次數(shù)達6 次~12 次,均值可能更為。
2.轉(zhuǎn)化細胞數(shù)量增加1 倍的時間稱倍增時間,亦可從細胞生長曲線中測知。
HPLC法含量測定 50mg 100688-200401 鹽酸坦洛新
含量測定 100mg 100689-200401 普伐他汀鈉
UV含量測定 100mg 100690-200401 托芬那酸
含量測定 100mg 100691-200401 鹽酸阿比朵爾
含量測定 100mg 100692-200501 甲鈷胺
含量測定 100mg 100693-200501 司他夫定
含量測定 200mg 100696-200401 氟比洛芬酯
含量測定 100mg 100697-200401 馬來酸多潘立酮
HPLC法含量測定 100mg 100698-200501 佐米曲普坦
含量測定 100mg 100699-200401 鹽酸洛美利嗪
含量測定 100mg 100700-200401 吡嘧司特鉀
轉(zhuǎn)化細胞
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