上海滬鼎生物主要供應(yīng)的抗體試劑有一抗、二抗等,供應(yīng)Abcam品牌,Abcam以、齊全的產(chǎn)品、完善的網(wǎng)絡(luò)支持功能和強(qiáng)大的隊(duì)伍得到客戶的認(rèn)可和贊譽(yù)!今天的內(nèi)容中,滬鼎教您優(yōu)化抗體的稀釋度方法,主要內(nèi)容如下:
一、抗體的稀釋度
抗體和抗原間的結(jié)合率取決于親和常數(shù)。親和常數(shù)可受到溫度、pH和緩沖液成分的影響。改變溶液中抗體和抗原的相對(duì)濃度也可控制抗體-抗原復(fù)合物形成的程度。由于通常無(wú)法改變抗原的濃度,因此必須針對(duì)每種應(yīng)用和每組實(shí)驗(yàn)條件確定各抗體的*工作濃度(稀釋度)。
許多Abcam抗體在數(shù)據(jù)表都有列出不同實(shí)驗(yàn)的推薦稀釋度。我們推薦嘗試用這些稀釋度開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。但是,這些稀釋度可能需要進(jìn)行某些優(yōu)化。
二、優(yōu)化抗體稀釋度:滴定實(shí)驗(yàn)
*滴度或稀釋度為在zui少背景/非特異性結(jié)合的情況下得到*染色效果的濃度(稀釋度)。必須通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定每次測(cè)定的*抗體濃度。通常通過(guò)在滴定實(shí)驗(yàn)中使用一系列稀釋度來(lái)確定。
當(dāng)實(shí)驗(yàn)室收到一種新抗體時(shí),建議嘗試用滴定實(shí)驗(yàn)確定*抗體稀釋度以獲得*結(jié)果。
要進(jìn)行滴定實(shí)驗(yàn),首先要選擇固定的孵育時(shí)間。然后制備一系列實(shí)驗(yàn)稀釋度的抗體以備測(cè)試。每種稀釋度應(yīng)針對(duì)相同類型的樣品進(jìn)行測(cè)試,以保持實(shí)驗(yàn)條件標(biāo)準(zhǔn)化。
許多抗體批間性能差別不大,因此您只需要進(jìn)行一次滴定實(shí)驗(yàn)。但是,多克隆抗血清抗體濃度在不同動(dòng)物間或不同血清采集時(shí)間可能顯著不同。在這些情況下,或者當(dāng)您注意到任何抗體的批次間染色結(jié)果有變化時(shí),我們推薦再次對(duì)該瓶抗體進(jìn)行滴定實(shí)驗(yàn)以獲得*濃度。
上海滬鼎生物科技有限公司為廣大客戶提供高質(zhì)量的免疫學(xué)和生命科學(xué)相關(guān)產(chǎn)品。質(zhì)量可靠,被全國(guó)各大院??蒲袡C(jī)構(gòu)認(rèn)可并為Elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品長(zhǎng)期供應(yīng)商。我們將以專業(yè)執(zhí)著,精益求精的精神服務(wù)于廣大科研用戶。
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