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液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用,主要考慮試樣的預(yù)處理和分析柱、檢測器的選擇。在試樣的預(yù)處理上,日前興起的固相(微)萃取使得許多含量低的成分得到精制提純,從而適于液相色譜的測定,而采用逆流萃取測定川芎嗪含量取得了好的效果。中藥中有些紫外吸收弱,或無特征紫外吸收的成分,直接用液相色譜測定,其靈敏度和分離度都不盡人意,利用柱前或柱后衍生化法可使這些成分較地測定出來。對于性大、脂溶性差物質(zhì),在YWGCl8柱上不易保留,用十二烷基磺酸鈉作為離子對試劑,降低其性,延長柱上的保留時間,取得較好的分離較果。
將液相色譜和質(zhì)譜這兩個有力的分析技術(shù)在線連接在一起,經(jīng)過三十年的發(fā)展已成為一項較為成熟的分析手段,但是它從形成伊始就存在著問題:從液相色譜流進(jìn)質(zhì)譜時,流動相的變化、溶劑的組成、溫壓離子化的問題制約著這種聯(lián)用技術(shù)發(fā)展,大氣壓離子化接口具有去除溶劑和離子化的雙重功效,它的引入,使得該技術(shù)在各個領(lǐng)域得到了的應(yīng)用。電噴霧離子源是一種軟電離技術(shù),一般只生成(M H) 和(M-H)-兩種分子離子峰,選擇性監(jiān)測(mz)190的負(fù)分子離子峰,具有較的靈敏度、度、一性,滿足了低濃度藥物研究的需求。由張莉等人研究的三維液相色譜法可以同步測定葛根素和阿魏酸兩種指標(biāo)。通過實驗證明:如果選擇合適的柱溫等色譜條件,乙醇作為反相液相色譜流動相,分析中藥及中成藥中成分,既安又。
結(jié)構(gòu)相似的物質(zhì),普通的檢測器難以檢測出來,液相色譜-電化學(xué)法可以地測定黃連粉中僅差一個基團(tuán)的黃芩苷和黃芩素的含量。樣品經(jīng)色譜柱分離后收集,再經(jīng)熒光分光光度計測熒光度,影響因素多,測定復(fù)雜,改進(jìn)后的液相色譜-熒光法則可以不經(jīng)衍生化和收集分離物,只經(jīng)化學(xué)處理除雜,濃縮后直接進(jìn)樣即可。用該法測定貫葉連翹中金絲桃素的含量也取得了較好的結(jié)果。
液相色譜-示差折光測黃芪精口服液中黃芪甲苷的含量也都取得了較為滿意的結(jié)果。對于只有紫外末端吸收,用紫外檢測時靈敏度低,基線易漂移,示差折光檢測其易受外界條件干擾,蒸發(fā)散射檢測器能克服以上不足,響應(yīng)值只與樣品質(zhì)量有關(guān),其信號相應(yīng)與質(zhì)量成正比,不同化合物,質(zhì)量相同則信號相應(yīng)基本一致。蒸發(fā)光散射檢測法是基于不揮發(fā)樣品分子對光的散射程度與其質(zhì)量成正比,與其所含基團(tuán)性質(zhì)無關(guān)。
只要選擇適當(dāng)?shù)臋z測器參數(shù),便可使流動相和溶劑*氣化,不產(chǎn)生信號,而樣品中的各個組分以不揮發(fā)粒子存在,對光有散射,以被檢測出來。因此,蒸發(fā)光散射檢測器可用于含不同基團(tuán)的多組分同時分離、分析。和紫外、熒光等方法相比,蒸發(fā)光散射檢測法對不同物質(zhì)有近似相同的響應(yīng)因子,因而不出現(xiàn)低濃度、響應(yīng)或濃度、低響應(yīng)的現(xiàn)象,有利于不同比例混合物的測定.液相色譜-蒸發(fā)光散射檢驗法測定銀杏葉中萜類內(nèi)酯含量、紅參及育精膠囊中人參皂苷Rg1和Re的含量和藤黃中藤黃酸含量都得到了好的結(jié)果。
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