類胡蘿卜素( carotenoids)是一類重要的天然色素的總稱, 普遍存在于動(dòng)物、高等植物、真菌、藻類的黃色、橙紅色或紅色的色素之中。它是含40個(gè)碳的類異戊烯聚合物, 即四萜化合物。典型的類胡蘿卜素是由8個(gè)異戊二烯單位首尾相連形成。類胡蘿卜素的顏色因共軛雙鍵的數(shù)目不同而變化。共軛雙鍵的數(shù)目越多, 顏色越移向紅色。迄今, 被發(fā)現(xiàn)的天然類胡蘿卜素已達(dá)700多種, 根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)的不同可以將其分為兩類, 一類是胡蘿卜素(只含碳?xì)鋬煞N元素, 不含氧元素,如B2胡蘿卜素和番茄紅素), 另一類是葉黃素(有羥基、酮基、羧基、甲氧基等含氧官能團(tuán), 如葉黃素和蝦青素) 。

ɑ和ß胡蘿卜素因其結(jié)構(gòu)性質(zhì)相似，分離是液相檢測的一個(gè)難點(diǎn)。常規(guī)鍵合相如C18很難將這兩種異構(gòu)體實(shí)現(xiàn)基線分離。

本文采用賽默飛Acclaim C30色譜柱按照GB5009.83-2016方法對(duì)ɑ和ß胡蘿卜素進(jìn)行分離，分離度可達(dá)到2.4.

樣品前處理

α-胡蘿卜素：25ug/ml，甲醇-甲基叔丁基醚溶解，再用初始流動(dòng)相1:1稀釋；β-胡蘿卜素：80ug/ml，正己烷溶解，再用初始流動(dòng)相1:1稀釋；

色譜條件：

色譜柱（貨號(hào)）:Acclaim C30

 4.6×150 mm,3 μm(貨號(hào)：075723)

流動(dòng)相：A：甲醇：乙腈：水=73.5:24.5:2

B：甲基叔丁基醚

流速：1mL/min

檢測器：UV，450nm

柱溫：20℃

進(jìn)樣量：20μL

儀器：Ultimate 3000

結(jié)論

按照國標(biāo)GB5009.83-2016分析胡蘿卜素異構(gòu)體，可以實(shí)現(xiàn)α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素2.39的分離度。且方法重現(xiàn)性良好。