一、原代細胞實驗?zāi)康暮鸵?nbsp;
通過這一實驗，要求學(xué)生了解哺乳動物染色體標本的制作方法，并對動物染色體進行觀察。 
二、實驗原理 
由于小鼠四肢骨內(nèi)骨髓細胞中的造血干細胞是生成各種血細胞和原始細胞，具有高度的分裂能力，本實驗采用這一材料，通過前處理，低滲，固定，制片，染色等步驟制得染色體標本，可觀察到許多處于分裂中期的染色體，可以進行染色體組型分析。 
三、實驗用品 
1．材料：小白鼠
2．器具：注射器（1ml,5ml）、5號針頭、解剖盤、解剖剪、鑷子、玻璃吸管、10ml刻度的離心管、離心機、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、濾紙、擦鏡紙、棉花、量筒、天平、恒溫水浴鍋 
3．藥品：0.01%秋水仙素、0.075MKCl、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液、0.01M磷酸緩沖液(PH6.8)，0.85%生理鹽水。 
四、實驗步驟 
1．預(yù)處理：實驗前2.5-3小時，按每克體重注射0.02ml，給小白鼠腹腔注射秋水仙素。 
2．?dāng)囝i處死動物，解剖小鼠內(nèi)生殖器官，鑒別雌雄性別。 
3．剝?nèi)」晒?，剔去肌肉組織，剪去兩端的股骨頭 
4．沖洗骨髓：吸取0.6ml生理鹽水,注射器針頭插入股骨一端,反復(fù)沖洗骨髓到8ml的離心管中. 
5．低滲：加入4.4ml0.075MKCl溶液,37oC水浴低滲40分鐘，中間（約20分鐘）用吸管吹打一次，使細胞分散，懸浮于溶液中。 
6．離心：1000rpm離心10分鐘后棄去上清液，離心之前加1ml固定液并用吸管輕輕吹勻，進行預(yù)固定。
7．固定I：沿管壁慢慢加入固定液5ml，用吸管吹打成細胞懸液后，室溫下靜置30分鐘，15分鐘時吹打一次。
8．離心：1000rpm離心10分鐘，棄上清液。 
9．固定II：同固定I。 
10．離心：同8離心后加0.3-0.5ml固定液，吸管吹打成細胞懸液。 
11．滴片：用吸管吸取細胞懸液，滴在預(yù)冷的載玻片上，在酒精燈火焰上微微加熱，室溫晾干
12．染色：10% Giemsa染液染色30分鐘； 
鏡檢：低倍———高倍 。 
五、注意事項 
低滲與離心等步驟的操作要輕。 
觀察細胞的標準為：
1．細胞完整，輪廓清晰，染色體分布在同一水平面上。
2．染色體形態(tài)和分布良好。
3．無重疊，即使有個別重疊，也要能明確辯認，以免差錯。
4．所觀察的細胞處于同一有絲分裂階段，即染色體螺旋化程度或染色體長短大致一樣。
在所觀察的原代細胞周圍，沒有離散的單個或多個染色體存在，以免影響計數(shù)。

5 x 10^5 cells/vial 人支氣管上皮細胞 HBEpiC

5 x 10^5 cells/vial 人氣管上皮細胞 HTEpiC

5 x 10^5 cells/vial 人小氣道上皮細胞 HSAEpiC

5 x 10^5 cells/vial 人肺成纖維細胞 HPF

1 x 10^6 cells/vial 人肺成纖維細胞 HPF

5 x 10^5 cells/vial 人支氣管平滑肌細胞 HBSMC

5 x 10^5 cells/vial 人氣管平滑肌細胞 HTSMC

5 x 10^5 cells/vial 人支氣管成纖維細胞 HBF

5 x 10^5 cells/vial 人骨骼肌細胞 HSkMC

5 x 10^5 cells/vial 人骨骼肌衛(wèi)星細胞 HSkMSC

5 x 10^5 cells/vial 人骨骼肌成肌細胞 HSkMM
原代細胞