分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均平等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固。

除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可平等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按慣例方法收集，應(yīng)留意防止溶血，紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。 style="color: #0000ff">血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會發(fā)作假陽性反應(yīng)。

如在冰箱中保存過久，其間的可發(fā)作聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超越一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)部分濃縮，散布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，防止氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上激烈振動。混濁或有沉積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。重復(fù)凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自收集時就應(yīng)留意。