近年來(lái)，隨著國(guó)內(nèi)生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展越來(lái)越大，一些不良商家開(kāi)始賣(mài)一些假冒試劑盒，給科研工作者帶來(lái)了很多的麻煩，浪費(fèi)了標(biāo)本，還影響了實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。小編特整理了一些鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法供廣大科研工作者和用戶(hù)參考，希望對(duì)廣大科研工作者有所幫助。

購(gòu)買(mǎi)前

【方法一】向廠(chǎng)家索要或下載說(shuō)明書(shū)，查找ELISA的性能指標(biāo)：準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線(xiàn)性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。一般來(lái)說(shuō)，除了校準(zhǔn)不一定每份說(shuō)明書(shū)都有外，其余的指標(biāo)一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的，可能沒(méi)有準(zhǔn)確度這個(gè)指標(biāo))。如果無(wú)法提供這些性能指標(biāo)，則說(shuō)明該試劑盒可能是假貨，或者試劑盒開(kāi)發(fā)過(guò)程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，有可能無(wú)法檢測(cè)出真實(shí)的樣本值。

【方法二】對(duì)于夸大ELISA涵蓋的指標(biāo)的范圍，尤其是不常見(jiàn)的種屬，可先去ELISA試劑盒供應(yīng)商(如eBioscience、R&D)上搜索，如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒，則有可能是假貨，需要小心謹(jǐn)慎。

【方法三】將“廠(chǎng)家名”、“ELISA”和“假貨”等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索，有的論壇如丁香園等會(huì)有打假曝光臺(tái)。

購(gòu)買(mǎi)后

【方法一】檢查說(shuō)明書(shū)、包裝盒的質(zhì)量，通常假冒偽劣產(chǎn)品為了降低成本，印刷的質(zhì)量會(huì)比較差。其次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。

【方法二】

I.如果購(gòu)買(mǎi)了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假，方法如下：

(1) 取出購(gòu)買(mǎi)的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物。

(5) 實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo)，試劑盒A只能檢測(cè)A，不能檢測(cè)B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

II. 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原，方法如下：

(1) 將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液

(2) 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體

(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物

(4) 實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)線(xiàn)性，則說(shuō)明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測(cè)作用，則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。