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來源:研域生物技術(上海)有限公司   2018年10月18日 09:38  

各位大蝦,我做了大鼠組織的TNF-α免疫組化,是取材后送到醫(yī)院病理科出錢代做的,現(xiàn)HE和免疫組化片子已經(jīng)做好,我才意識到?jīng)]有陽性和陰性對照,請問這兩種對照該怎么弄,是我自己想辦法還是該病理科負責給我設立?需要我自己再買相應的試劑嗎?以前沒有做過,所以一頭霧水,請不吝賜教,多謝!

 

免疫組化染色中的對照片的設置非常重要,它是判斷您的染色是否成功的關鍵依據(jù),而且也是檢測每一個抗體的質(zhì)量標準,常設的對照如下:自身對照、陰性對照(空白對照、替代對照、抑制對照、 吸收實驗對照)、陽性對照。
A、自身對照:在同一切片上與檢測的目的物對照比較。如Actin、CD34在正常組織中的血管壁肌層應為陽性,Vimentin可以間質(zhì)細胞,Desmin以血管壁及肌束為對照,S-100以小神經(jīng)末為對照等,如果應為陽性的組織是陽性,則技術操作正確,如為陰性,則表明技術或免疫試劑質(zhì)量有問題。
B、空白對照:用緩沖液替代一抗。
C、替代對照:用非免疫血清替代一抗。
D、抑制對照:使用與一抗相同的非標記抗體稀釋特異性一抗,適于直接法。
E、吸收實驗對照:已知抗原與相應的抗體混合,發(fā)生結合沉淀,再用此沉淀抗體復合物進行免疫組化實驗,結果為陰性。
F、陽性對照:用以含有靶抗原的切片進行對照。

 

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